Nuestra investigación se centró en el campo del trastorno por consumo de alcohol. En este estudio se destaca la metodología comúnmente utilizada en el modelo de ratón de dependencia de Alco. Este modelo es un vapor de etanol intermitente crónico emparejado con el paradigma de elección de dos botellas.
El paradigma de elección de dos botellas CIE. El equipo automatizado de elección de dos botellas permite el monitoreo del comportamiento de consumo de alcohol del ratón mediante el registro de la frecuencia de los súper toques. Esto nos permite adquirir información adicional más allá del volumen consumido, como el momento de los episodios de bebida a lo largo de una sesión de bebida.
En los estudios preclínicos del trastorno por consumo de alcohol, los enfoques como las imágenes del cerebro completo, la quimiogenética y la optogenética con varios de los ratones transgénicos virales se utilizan a menudo para avanzar en la investigación en este campo. También se utilizan otros enfoques como el modelado computacional. El modelo CIE de dos botellas para la dependencia del alcohol se ha establecido durante muchos años.
Sin embargo, esperamos que la adopción del enfoque sea más accesible para la comunidad investigadora en general. Comparar con las otras técnicas utilizadas para estudiar el trastorno por consumo de alcohol. La elección de dos botellas y el paradigma CIE tiene una serie de ventajas que aumentan la relevancia traslacional, como la inducción de los síntomas de abstinencia significativos y el desarrollo de la escalada de la ingesta de alcohol.
Este enfoque es ideal para su uso en el estudio de los cambios neurobiológicos relevantes causados por la dependencia del alcohol. Para comenzar a habitar, traslade a los ratones alojados en el grupo a sus jaulas individuales para beber 30 minutos antes de que se apaguen las luces. Registre el volumen de cada botella y luego deje que los ratones beban durante dos horas.
Registre los volúmenes de las botellas después del período de bebida. Ahora exponga a los ratones a al menos dos semanas de bebida de referencia de dos botellas para establecer una ingesta estable de etanol. Pruebe a los ratones dándoles una botella de agua y una segunda botella que contenga un 15% de etanol.
Registre los volúmenes de cada botella antes y después del período de bebida de dos horas. Una vez que los ratones hayan alcanzado una línea de base estable de ingesta de etanol, divídalos en dos grupos en función de su ingesta y devuélvalos a su jaula doméstica. Inyectar intraperitonealmente a los ratones una solución de etanol-pirazol.
Inyecte todos los controles de aire y los otros grupos con la misma dosis de pirazol mezclada con solución salina. Después de las inyecciones, coloque los ratones de control de aire en sus jaulas domésticas y coloque las jaulas CIE dentro de la cámara de vapor. Cierre las puertas y ajuste la bomba al nivel de vapor adecuado.
A continuación, configure el tiempo de ejecución del experimento y luego presione iniciar en la pantalla de control de la cámara de vapor CIE 30 minutos antes de que se apague el sistema de vapor. Determine la concentración de etanol en sangre de los ratones. Después de recolectar la sangre, devuelva los ratones a la prueba de elección de dos botellas la semana después de la CIE.
Centrifugar las muestras de sangre a 208 g durante 1,0 minutos a cuatro grados centígrados para separar el plasma. Utilice un analizador de etanol de tasa de oxígeno para determinar la concentración de etanol en sangre. La ingesta inicial de etanol de referencia durante el período de tres semanas se estabilizó en 2,00 más o menos 0,21 gramos por kilogramo antes de la CIE.
Una prueba post hoc de Bonferroni mostró que los ratones CIE aumentaron significativamente su ingesta de etanol en la sexta semana posterior al vapor en comparación con su volumen de bebida de referencia. Los ratones CIE consumieron significativamente más etanol que los ratones no dependientes en PV6. La prueba post hoc de Bonferroni también mostró que en PV6, los ratones dependientes de etanol tenían una ingesta de etanol significativamente mayor en comparación con sus propios ratones basales y no dependientes.
Las concentraciones de etanol en sangre analizadas del grupo CIE mostraron un promedio semanal de 173,12 miligramos por decilitro.
