El trasplante de corazón en ratón es un modelo valioso para estudiar la respuesta aloinmune Aquí, presentamos una nueva técnica quirúrgica de trasplante de corazón abdominal heterotópico en ratón. En el trasplante tradicional de corazón de ratón, la aorta donante y la aorta abdominal receptora se anastomó. La arteria pulmonar se anastomosed a la vena cava inferior receptora.
En este nuevo trasplante de corazón de ratón. La aorta donante se anastomosed a la aorta abdominal receptora y la vena cava inferior intratorácica donante se anastomosed a la vena cava inferior receptora. Ahora comenzamos la demostración experimental.
Después de poner el ratón en la caja para la inhalación de isoflurano y la anestesia, pesar el ratón. Según el peso del ratón, para dar inyección intraperitoneal de ketamina xilazina acepromacina para anestesiar el ratón. Fijar y desinfectar el ratón en la mesa de operaciones cuando la anestesia haya afectado.
Corte la piel desde el cuello hasta la parte inferior del abdomen. Corte los músculos de la pared abdominal y retire suavemente las vísceras a la izquierda. A continuación, exponga la vena cava inferior.
Inyecte 0.4 mililitro de la solución de heparina lentamente en la vena cava inferior y espere un minuto antes de sacar la aguja. Saque la aguja y corte tanto la vena cava inferior como la aorta abdominal con tijeras para acelerar la exsanguinación. Abra la cavidad torácica realizando un corte en forma de U.
Exponer completamente el corazón, los pulmones y todos los vasos sanguíneos del tórax. Exponer la aorta torácica. Cortar la mitad de la luz.
Inserte el tubo de irrigación en la abertura de la aorta torácica. Corte la vena pulmonar para facilitar el riego y el drenaje. Inyecte al menos dos milímetros de solución HTK de cuatro grados.
El corazón deja de latir por completo hasta que el flujo de salida de la vena pulmonar está completamente claro. Saque el tubo de riego y suelte el esternón. Retire el timo.
Despoje ligeramente la grasa alrededor del arco aórtico. Exponer y ligar el tronco de la arteria pulmonalis con una sutura de 10 cero. Separar el hecho y el tejido conectivo unido en la vena cava inferior intratorácica Exponer y ligar la vena cava superior con siete sutura cero y cortarlo detrás de la ligadura.
Haga una sutura de siete ceros alrededor de la base del corazón debajo del arco aórtico. Vena cava inferior y la aurícula abilica, entonces ligar las ramas de la arteria pulmonar y los recipientes venosos del pulmón. Transecto el arco aórtico lo más distal posible, pero asegúrese de tener una luz clara sin las aberturas de las ramas laterales.
Los vasos pulmonares bajo la ligadura y la vena cava inferior intratorácica cerca del diafragma. Ahora, retire el corazón del pecho. Coloque el corazón del donante explantado en una solución hdk fría de 4 grados y para preservar temporalmente.
Asegúrese de no extender un tiempo de isquemia fría más de 60 minutos. Ahora, comenzamos a demostrar el funcionamiento del receptor. Los pasos iniciales de la operación son similares a los mostrados previamente para el ratón donante, incluyendo anestesia y esterilización.
Corte de piel abdominal de manera transversal. Después de la disección intestinal, cubra los órganos abdominales con una gasa húmeda con solución salina. Exponga la vena cava inferior y la aorta abdominal y libere del tejido graso circundante.
Si es necesario, ligar o electrocauterizar los vasos de la rama lateral debajo de los vasos renales. Inserte las primeras micro- subapas hemostáticas desde la derecha en la parte superior del cerebro y la aorta debajo de los vasos renales. Inserte el segundo micro- denóscer hemostático de la derecha en la parte inferior del cerebro y de la aorta.
Hay más de un centímetro para la aorta y el espacio venoso para la anastomosis entre dos espérceps hemostáticos. Haga una incisión en la aorta, un poco más cerca de la abrazadera inferior que de la abrazadera superior. Además, puede usar una aguja 30G para hacer un pequeño agujero y abrirlo con micro tijeras.
Coloque el corazón en la cavidad abdominal. La aorta en visión y la vena cava en el otro lado y cubrirlo con una pequeña gasa húmeda. Adaptar y coser la aorta donante a la aorta receptora, comenzando caudalmente.
Haga un nudo y proceda con una sutura corriente a la parte superior de esta incisión, alrededor de cuatro a cinco puntos de sutura. A continuación, voltear el corazón hacia la derecha, cubrirlo de nuevo, y continuar la sutura en el lado izquierdo hasta llegar al extremo caudal y anudarlo. Use micro tijeras para cortar un agujero redondo en la vena cava inferior abdominal del receptor, que debe tener el mismo tamaño de la luz de la vena cava inferior intratorácica del donante.
La incisión debe estar localizada craneal a la anastomosis aórtica planificada. Haga que la incisión venosa sea más grande que la incisión aórtica. Rubor donor' vena cava inferior intratorácica de s.
Coser la vena cava inferior intratorácica donante a la vena cava receptora comenzando caudalmente. Ate un nudo y realice una sutura corriente hasta que se alcance la parte superior de la incisión. Use cinco puntos de sutura y continúe la sutura a la izquierda.
Finalmente, ate un nudo en una esquina de la cola y apriete cuidadosamente. Tenga cuidado de no tirar demasiado apretado. Establecer pequeñas partes de la esponja hemostática alrededor de la vena y la anastomosis aórtica.
Retire primero las abrazaderas micro hemostáticas inferiores y luego las superiores y enjuague la cavidad abdominal con cloruro de sodio caliente al 0,9%. Quite la esponja hemostática. Observe los latidos del corazón trasplantado.
Si todo es correcto, el corazón comenzará a contraerse de nuevo. Vuelva a colocar los intestinos en la cavidad abdominal y ciérrelo con cuatro suturas cero. Proporcionar un ambiente cálido y rico en oxígeno para que los ratones trasplantados se recuperen.
En nuestro trabajo de investigación anterior, divulgamos sobre una comparación de 40 casos totales de vena cava a la vena cava contra 40 casos de la arteria pulmonar tradicional al procedimiento de la anastomosis de la vena cava. El tiempo de la operación para la anastomosis del recipiente en una vena cava a un grupo de la vena cava era perceptiblemente más corto comparado a la arteria pulmonar convencional al grupo de la vena cava. La técnica quirúrgica del trasplante abdominal heterotopic del corazón en ratones representa un modelo estándar para la investigación en inmunología del trasplante.
Esta técnica nueva para la reconstrucción del circuito de sangre presentada aquí está facilitando el trasplante abdominal del corazón en ratones. Y esto se llama concomitante con la reducción de la isquemia caliente y el tiempo de rebeating del corazón injertado, mejorando así la tasa de éxito de este modelo.
