Diese Methode hilft, Schlüsselfragen auf dem Gebiet der Allergie und Immunologie zu behandeln, insbesondere solche, die phänotypen betreffen, die mit Veränderungen der Körpertemperatur in Verbindung gebracht werden können. Die Hauptvorteile dieser Technik sind, dass sie kostengünstig, nicht-invasiv ist und keine Anästhesie erfordert. Die Implikationen dieser Technik ermöglichen es Forschern, den Stress und schmerzende Mäuse während der Temperaturmessung zu reduzieren und gleichzeitig die Auswirkungen der Anästhesie zu eliminieren und/oder Verhaltensphänotypen zu visualisieren.
Um die Körpertemperatur der Maus nach der Anästhesie zu messen, bestätigen Sie die Sedierung durch Atemfrequenz oder Unbeweglichkeit und greifen Sie die Maus mit Zeigefinger und Daumen am Nacken und den Schwanz mit einem rosa Finger. Während Sie die Maus parallel zur Laborbankoberfläche halten, platzieren Sie einen Infrarot-Thermometersensor unter dem Unterbauch mit der äußeren flachen Oberfläche des Thermometers zwei bis fünf Millimeter von der Oberfläche des Bauches zwischen den beiden oberen Brustwarzen entfernt. Drücken Sie dann den Auslöser des Thermometers, um die Temperatur des Tieres zu messen, und achten Sie darauf, die Maus und das Thermometer stabil zu halten.
Um die Körpertemperatur der Maus ohne Anästhetikum zu messen, nehmen Sie die Maus in der Mitte des Schwanzes auf und setzen Sie den Bauch aus. Lassen Sie die Maus mit ihren Vorderpfoten an einer geraden Kantenoberfläche festhalten und halten Sie den Auslöser, um die Temperatur zu messen. Alternativ können Sie die Maus an der oberen geraden Kante des Thermometers festhalten und die Maus während der Temperaturmessung auf der äußeren flachen Oberfläche des Thermometers mit dem Bauch direkt über dem Infrarotsensor sitzen lassen.
Für eine passive systemische Anaphylaxie-Sensibilisierung verwenden Sie eine Ein-Milliliter-Spritze mit einer 26-Spur-Nadel ausgestattet, um 200 Mikroliter frisch zubereitetes Anti-Dinitrophenol, oder DNP, IgE in PBS, in das Peritoneum jedes Empfängertiernurrme nur seitlich zur Mittellinie zwischen den minderwertigsten und zweituntersten Brustwarzen zu injizieren. Messen Sie 24 Stunden nach der Injektion die Körpertemperatur jedes Empfängertiers wie gezeigt, und laden Sie eine Ein-Milliliter-Spritze mit einer 30-Spur-Nadel mit 100 Mikroliter frisch zubereitetem DNP-Humanserumalbumin. Um eine passive systemische Anaphylaxie zu induzieren, setzen Sie die Nadel auf der medialen Seite des Auges in einem flachen Winkel ein, der hinter dem Auge zielt, und injizieren Sie das gesamte Volumen der Lösung intravenös in die retro-orbitale venöse Sinus.
Dann legen Sie die Maus allein in einen Erholungskäfig mit Überwachung bis zur vollen Recumbency, und messen Sie die Körpertemperatur und Aktivität alle 10 Minuten für 70 Minuten. IgE sensibilisierte Mäuse zeigen einen maximalen Temperaturabfall von drei Grad Celsius bei 20 Minuten, während PBS-Kontrollmäuse einen maximalen Rückgang von 1,1 Grad Celsius im gleichen Zeitraum nach der Herausforderung aufweisen. Verhaltensbeobachtungen können auch bei nicht-anästhesierten Tieren durchgeführt werden, um die Beziehung zwischen den beobachteten Temperatursenkungen und der Mausaktivität zu bewerten.
In dieser repräsentativen Herausforderung für die Maus-Lebensmittelallergie zeigte die PBS-Kontrollgruppe einen signifikanten Temperaturabfall 10 Minuten nach der Herausforderung im Vergleich zur behandelten 2CA-Hemmergruppe. Die Auswertung der Aktivitätswerte und Temperaturrückgänge aus dieser Lebensmittelallergie-Herausforderung ergab eine statistisch signifikante Korrelation zwischen den beiden Datensätzen. Im Anschluss an dieses Verfahren können weitere Experimente mit Mauskörpertemperaturmessungen durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen zu Verhaltensphänotypen zu beantworten, die mit einer Körpertemperaturänderung verbunden sind.
