Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Ministerium für Gesundheit, soziale Dienste und Gleichheit. Delegation der Regierung für den nationalen Plan auf Drogen, Forschungsprojekte zur Drogenabhängigkeit, 2014I007; Ministerium für Wirtschaft und Wettbewerbsfähigkeit (MINECO), Health Institute Carlos III, Netzwerk der süchtig machende Störungen (RTA) RD12 / 0028/0005 und RD16 / 17.07.00 und der Europäischen Union, der FEDER Mittel "Una Manera de Hacer Europa" und der PSI2014-51847-R.

Alle Verfahren, die Mäuse und deren Pflege erfüllt mit nationalen, regionalen und lokalen Gesetze und Verordnungen, die gemäß Richtlinie 2010/63/EG des Europäischen Parlaments und des Rates vom 22. September 2010 über den Schutz von Tieren, die für verwendet werden wissenschaftliche Zwecke. Der Einsatz von Tieren und Pflege Ausschuss der Universität Valencia genehmigt dieses Protokolls.
(1) Materialien und Set-up für konditionierte Ort Präferenz:
<ol><li>3 Tage vor dem Test für 1 – 2 min. Mäuse zu behandeln. Die Schwanzwurzel sollten erfasst werden. Der Körper sollte wenn möglich unterstützt werden. Dies geschieht, Schmerzen und Leiden zu minimieren, beim Umgang mit einem Tier und störende Variablen, wie zum Beispiel Stress zu verhindern. Hinweis: 1 männliche Mäuse waren 60 Tage alt (junge Erwachsene) mit einem Gewicht von 35-40 g in die heutigen Experimenten beschäftigt. Arzneimittel-induzierter Wiedereinsetzung kann bei Mäusen beiderlei Geschlechts durchgeführt werden. Jedoch über Stress-induzierte Wiedereinstellung soziale Niederlage Paradigma richtet sich nur für männliche Nager wie Weibchen keine aggressive Reaktion bei den ansässigen Mäusen zu induzieren.</li>
	<li>Statt Klimaanlage verwenden Sie identische Kästen mit zwei identischen Fächern (30,7 cm langen × 31,5 cm Breite × 34,5 cm hoch) durch eine kleinere zentrale Grauzone (13,8 lange × 31,5 cm Breite × 34,5 hohe) getrennt. Hinweis: Fächer haben unterschiedliche Texturen und Wandfarben (einen glatten Boden im schwarzen Fach und einen rauen Boden in der weißen). Jedes Fach der CPP-Box enthält vier Infrarot-Lichtstrahlen und sechs in der zentralen Fach. Dies ermöglicht die Aufnahme von Kreuzungen zwischen Fächern und die Position des Tieres.</li>
	<li>Legen Sie oben die Raumbeleuchtung (off oder gesenkt) jeden Tag. Verwenden Sie rote Ampeln (empfohlen), wie Tiere es nicht wahr nehmen und es ist für den Experimentator (ca. 40 Lux bei 1 m über dem Boden gemessen) gedämpft.</li>
	<li>Richten Sie das Programm registrieren 15 min für Pre- und Post-Klimaanlage test (siehe die Tabelle der Materialien für Software) (Abbildung 2)</li>
	<li>Bereiten Sie die Kokain-Lösung für das ganze Experiment benötigt. Auflösen von Kokain-Hydrochlorid in 0,9 % NaCl (Kochsalzlösung) in einem Volumen von 0,1 mL/10 g Körpergewicht. Vortex-Mischung und Store bei 4 ° C am Ende des Tages. Hinweis: Kokain Konzentrationen variieren je nach Zweck der Studie. Wenn das Ziel ist es, die Eingangssignale Dosen von Kokain zu bewerten, könnte eine Konzentration von 1 mg/kg verwendet werden, das heißt unwirksam bei Kontrolltieren, wie in früheren Studien24,35zu sehen. Wenn eine wirksame Dosis der Zweck ist, kann eine Konzentration von 6 mg/kg, gewählt, die ist wirksam, aber nicht dazu veranlassen, Wiedereinstellung24, oder eine 25 mg/kg-Konzentration, die effektive und Wiedereinstellung der Präferenz19induziert.</li>
	<li>Testen Sie die Tiere während ihrer dunklen Phase und verwenden Sie das gleiche Feld für jedes Tier über Tage hinweg.</li>
	<li>Bringen Sie Tiere täglich zu den Prüfraum in ihren Käfigen zu Hause und lassen sie ungestört für 15 min als kurzer Gewöhnung an all die Test-Geräusche.</li>
</ol>2. test
<ol><li>Erwerb Hinweis: Das Verfahren der Ort Konditionierung, unvoreingenommene in Bezug auf die erste spontane Präferenz besteht aus drei Phasen: Pre-Klimaanlage, Klimaanlage und Post-Klimaanlage (Abbildung 1).<ol>
<li>
Vorbehandlung (Pre-C) (3 Tage) (Abbildung 2, Abbildung 3 Abbildung 4( ) Hinweis: Hier wird der neutrale Wert der Fächer im Feld CPP ausgewertet. Messen Sie die Zeit in jedem Fach und später damit verbracht in dasselbe Fach in der Post-Klimaanlage Test zu vergleichen.<ol>
<li>Bringen Sie die Tiere in den Testraum und lassen für 15 min gewöhnt.</li>
			<li>Überprüfen Sie, dass Guillotines aus dem Käfig entfernt werden.</li>
			<li>Richten Sie den Computer und das Programm. Geben Sie Tier ID ein und drücken Sie den Befehl "Trial" und "Start" (Abbildung 2).</li>
			<li>Platzieren Sie den Mauszeiger sanft in die mittlere Kammer (graue Fach) und verlassen Sie den Prüfraum mit minimalem Rauschen.</li>
			<li>Bringen Sie alle Tiere zurück in ihre Heimat Käfige und sichern Sie Ihre Daten, wenn der Prozess abgeschlossen ist.</li>
			<li>Mäuse auf beide Fächer des Apparates für 15 min zugreifen können (900 s) pro Tag an 3 aufeinanderfolgenden Tagen.</li>
			<li>Am 3. Tag notieren Sie sich die Zeit in jedem Fach über einen Zeitraum von 900 s, und speichern Sie sie für die Zuordnung der Fächer in der nächsten Phase (Abbildung 3).</li>
			<li>Weisen Sie die Hälfte der Tiere in jeder Gruppe, das Medikament oder das Fahrzeug in ein Fach (z.B.schwarz) und die andere Hälfte in das andere Fach (z.B.weiß) (Abbildung 4) zu empfangen. Hinweis: Die endgültige Verteilung der Tiere muss sicherstellen, dass die Hälfte der Tiere zunächst bevorzugte Fach und die andere Hälfte in das Fach nicht bevorzugten zugeordnet sind. Darüber hinaus erhielt die Hälfte der Tiere das Medikament in ein Fach (z. B. eine schwarze) und die andere Hälfte in die andere (in diesem Fall, weißen).</li>
			<li>Balance-Resultate in der Gruppe in beiden Fächern sowie in Gruppen (Test gruppenunterschiede mit einer Varianzanalyse (ANOVA)). Als ungefähre Orientierung sollte Werte um 360-370 s in der Pre-C-Test (Abbildung 4). Hinweis: keine signifikanten Unterschiede sollten zwischen den Zeitaufwand in der Droge gepaart und Fahrzeug gepaart Fächer während der Pre-C-Test erkannt werden.</li>
			<li>Schließen Sie Tiere, die eine starke Abneigung oder Vorliebe für jedes Fach aufweisen. Halte Abneigung als weniger Zeit als 33 % im Abteil, und bevorzugt zu berücksichtigen, wenn das Tier mehr als 67 % der Gesamtzeit in diesem Fach ausgegeben.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
(4 Tage) Klimaanlage (Abbildung 5( )
		<ol>
<li>Wiegen Sie die Tiere und verwenden Sie diese Gewichte für Kokain Dosen während der Aufbereitung.</li>
			<li>Bereiten Sie Spritzen mit Kokain oder Kochsalzlösung basierend auf Körpergewicht.</li>
			<li>Eine Maus zu einem Zeitpunkt zu injizieren, intraperitoneal (Ip) und legen Sie es sofort sanft in den zugewiesenen schwarzen oder weißen Innenraum ihrer Box.</li>
			<li>Injizieren Sie nach einem Intervall von 4 h die Medikamentendosis unmittelbar vor die Maus auf das Medikament gepaart Fach für 30 min (Abbildung 5) beschränkt ist.</li>
			<li>Wechseln Sie diese Prozedur jeden Tag beginnend mit Kokain an den Tagen 1 und 3 und saline an den Tagen 2 und 4.</li>
			<li>Kontrollieren Sie die Entbindung in beiden Fällen erfolgt durch die Guillotine Tür, die trennt die beiden Fächer macht den zentralen Bereich unzugänglich. Hinweis: In dieser Phase gibt es keine Notwendigkeit, das PC-Programm einrichten.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Post-Klimaanlage (Post-C) (1 Tag)
		<ol>
<li>Bringen Sie die Tiere in den Testraum und lassen für 15 min gewöhnt.</li>
			<li>Entfernen Sie die Guillotine Tür trennt die beiden Fächer.</li>
			<li>Richten Sie den Computer und das Programm. Geben Sie Tier IDs und drücken Sie den Befehl "Start".</li>
			<li>Notieren Sie die Verweildauer der unbehandelten Mäuse in jedem Fach einen Zeitraum 900 s Beobachtung.</li>
			<li>Wenn der Prozess abgeschlossen ist, bringen Sie die Tiere zurück in ihre Heimat Käfige und sichern Sie Ihre Daten.</li>
			<li>Der Auffassung, dass das Medikament Ort Präferenz induziert hat, wenn die Verweildauer in der Droge gepaart Fach während der Post-C deutlich größer als in der Pre-C-Test ist. Sollten Sie das Gegenteil der Fall ist, eine Abneigung gegen das Fach Medikament gepaart.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Vom Aussterben bedroht
	<ol>
<li>Führen Sie eine wöchentliche Aussterben-Sitzung in allen Gruppen/Tiere, die eine Vorliebe für das Medikament gepaart Fach entwickelt.</li>
		<li>Legen Sie das Tier in der Vorrichtung (ohne Guillotines) für 15 min (identisch mit der Pre- und Post-C-Tests) (Abbildung 1). Hinweis: Wenn die Dosis in beschäftigt die CPP ist hoch (25 mg/kg), 1 vom Aussterben bedroht-Sitzung pro Woche durchführen. Wenn eine Eingangssignale Dosis (1 mg/kg) ist, führen Sie 2 Aussterben Sitzungen pro Woche (z.B. Montag und Donnerstag).</li>
		<li>Betrachten Sie die Präferenz ausgelöscht, wenn Daten aus dem Aussterben Test keine Unterschiede in Bezug auf die Pre-C-Test zeigen, aber sie Unterschiede in Bezug auf die Post-C-Test zeigen.</li>
		<li>Wiederholen Sie den Test 24 h später um die Löschung zu bestätigen.</li>
	</ol></li>
	<li>Wiedereinführung der CPP
	<ol>
<li>
Priming-induzierte Wiedereinstellung
		<ol>
<li>Bewerten Sie die Auswirkungen einer Grundierung Dosis Kokain 24 h nach der Bestätigung vom Aussterben bedroht. Hinweis: Priming-Dosen sind die Hälfte der vorherigen Dosis, die das Tier während der Aufbereitung erhalten hat. Die Wiedereinstellung Test durchläuft das gleiche Protokoll wie Pre-C und Post-C-Tests, mit der Ausnahme, dass Tiere die Dosis von Kokain in einem nicht-Kontingent erhalten Platz 15 min vor dem Test. Die Wirksamkeit des Medikaments Priming bei der Induktion von Wiedereinsetzung kann gesteigert werden, nach wiederholter Aussterben/Wiedereinsetzung23, Erfahrungen, obwohl die Reihenfolge der Dosen nicht scheint, um eine Rolle in den Ergebnissen36erhalten.</li>
			<li>Bringen die Tiere in einem anderen Raum aus den Prüfraum (nicht-Kontingent Platz) (Abbildung 6).</li>
			<li>Injizieren sie mit Hälfte der vorherigen Dosis Kokain (wärez.B., wenn Tiere mit einer Grundierung-Dosis 25 mg/kg Kokain konditioniert wurden 12,5 mg/kg).</li>
			<li>Bringen sie zurück zu ihrer Vivarium für 15 Minuten.</li>
			<li>Nehmen sie in den Prüfraum und legen Sie die Tiere in den Apparat sofort (ohne die Guillotine Türen trennen die Fächer) für 15 min (identisch mit der Pre- und Post-C-Tests).</li>
			<li>Betrachten Sie die Differenz in Sekunden die Zeit in das Medikament gepaart Fach während der letzten Sitzung vom Aussterben bedroht und die Wiedereinsetzung-Test als Maß für den Grad der Wiedereinstellung der Voreinstellung durch das Medikament verursacht.</li>
			<li>Wiederholen Sie vom Aussterben bedroht-Wiedereinstellung jedesmal mit abnehmender Dosen bis es bestätigt wird, unwirksam. Hinweis: Eine Kochsalzlösung Einspritzregelung kann verwendet werden, um die Kapazität von Kokain Priming (und nicht der Injektion selbst) zu steuern, Wiedereinstellung zu induzieren.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Stress-induzierte Wiedereinstellung
		<ol>
<li>Bewerten Sie die Auswirkungen der eine Stress-induzierte Wiedereinsetzung 24 h nach der Bestätigung vom Aussterben bedroht Hinweis: Wiedereinsetzung Tests sind identisch mit denen in Post-C (freie Gehfähigkeit für 15 min), durchgeführt, mit der Ausnahme, dass Tiere 15 min getestet werden, nachdem die soziale Niederlage in eine agonistische auftreten (Abbildung 6)</li>
			<li>Nehmen Sie die Tiere in einen anderen Raum aus der CPP-Zimmer.</li>
			<li>Platzieren Sie die experimentelle Maus mit einer aggressiven Gegner Sex gleich Alter und Körpergewicht in den Kunststoffkäfig (Abbildung 6) abgestimmt. Hinweis: Die agonistische Begegnung besteht aus einem 10 min. Test in einem neutralen transparent Kunststoffkäfig (23x13.5x13cm) mit einer Niederlage für die experimentelle Maus. Zur Vorbereitung des aggressiven Gegners zuerst isolieren Sie verschiedene Tiere, die in Alter und Körpergewicht als die experimentellen Mäuse für 3 Wochen zu entsprechen. Trainieren sie kämpfen Erfahrungen sammeln und testen, um hohe aggressives territoriale Verhalten haben. Um aggressive Artgenossen zu erhalten, Mäuse müssen mindestens 3 Wochen lang isoliert und dann ausgebildet in aggressiven Verhaltensweisen angreifen. Tiere werden in einer neutralen Umgebung, vor denen sie paarweise ausgebildet. Wir lassen Sie sie beißen die Gegner 2 oder 3 Mal und sie aus dem Käfig immer das Training beenden, bevor einer der beiden Mäuse Unterwerfung, zeigt so, dass die Erfahrung der Begegnung aggressives Verhalten verstärkt. Nach Aggression (Bedrohung und Angriff der aggressiven Artgenosse) leiden, sollten experimentellen Mäuse Vermeidung/fliehen und Defensive/submissive Verhalten präsentieren. Das Kriterium besteht darin, eine bestimmte Haltung der Niederlage, gekennzeichnet durch eine aufrechte unterwürfige Position, limp Vorderpfoten nach oben abgewinkelten Kopf und Ohren (Abbildung 6) eingefahren. Nach Burke Et Al., 2016, man bedenkt, dass die sozialen Begegnung früher beendet wird, wenn der Eindringling eine devote gleichgültige Haltung zeigt > 8 s oder 13 Angriff Bisse aufgetreten ist. Eine andere Möglichkeit zum Bildschirm Tiere ohne erhebliche Verletzungsgefahr wäre das Tier in einem Netz-Gehäuse mit einem Loch, nicht groß genug, um jedem Tier übergeben Tempo.  Aggression konnte nachgewiesen werden, ohne Unterwerfung Tiere, aggressives Verhalten zu lenken.  Wenn ein Tier eine Verletzung mit einer Wunde 1 cm im Durchmesser und/oder direkte Einwirkung des Muskels trägt, ist aus der Studie ausgeschlossen und sollte eingeschläfert werden.</li>
			<li>Nehmen Sie nach 10 min der agonistischen Begegnung die Mäuse in den Testraum und die Tiere in der CPP-Apparat sofort (ohne die Guillotine Türen trennen die Fächer) für 15 min (identisch mit der Pre- und Post-C-Tests).</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. statistische Analyse
Hinweis: Optimale Stichprobengröße sollte mindestens 15 Tiere pro Gruppe.
<ol><li>Analysieren der Zwischenzeit verbrachte in dem Medikament gepaart Fach der Gruppe durch eine gemischte ANOVA mit einem zwischen Variablen, Behandlung, mit zwei Ebenen (Kontrollgruppe, Versuchsgruppe, Beispiel für zwei Gruppen ist in Abbildung 7 c), und in Variable-Tage, mit 2 Ebenen (Pre-C und Post-C). Hinweis: In der Kontrollgruppe Tiere erhalten das Medikament aber haben keine Umwelt Manipulationen. Auf der anderen Seite sind Tiere in der experimentellen Gruppe unterschiedliche Umweltbedingungen ausgesetzt. Vergleichen Sie die Zeit in der Droge gepaart Fach am Post-C Tag mit Respekt die Pre-C zu testen, um festzustellen, ob es gibt keine signifikanten Unterschiede in der Empfindlichkeit auf das Medikament.</li>
	<li>Darüber hinaus führen Sie Bonferroni Post-hoc-Analysen, um entweder die wesentlichen Punkte zu überprüfen.</li>
	<li>Analysieren von Daten im Zusammenhang mit vom Aussterben bedroht und Wiedereinstellung Werte in den Gruppen, dass entwickelten Präferenz durch Zugewinn t-Tests weiterhin mit dem Aussterben-Wiedereinsetzung-Verfahren im Laufe des Experiments, aber im letzten Moment, sie zu analysieren mit einer ANOVA mit einem in Variablen (Tage) mit der Anzahl der Ebenen je nach jeder Gruppe. Hinweis: Wenn die Anzahl der Vergleiche erhöht wird, stieg die Zahl derjenigen, die erheblich sein wird durch Zufall auch. Als solche korrigieren"um zu vermeiden Fehlalarme (Typ-1-Fehler), wir" den p-Wert, wodurch des Tests eher konservativen mit der Bonferroni-Korrektur für mehrere t-Tests. Für die Wiedereinstellung Test sollte der Vergleich zwischen der Wiedereinstellung-Test und der letzte vom Aussterben bedroht-Test erfolgen. Daher besteht keine Notwendigkeit zur Korrektur.</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Der entscheidende Punkt der Droge Suchtforschung ist die Entwicklung von Behandlungen, die Begierde zu verringern und folglich reduzieren die Anfälligkeit für Rückfälle. Dank der Wiedereinstellung Modell des CPP Paradigmas ist es möglich, Untersuchung des Einflusses von verschiedenen prozeduralen und Umweltfaktoren, die Rückfall, modulieren die Priorität der zukünftigen Forschung hat. Es gibt einige wichtige Punkte zu beachten, wie das CPP-Paradigma ist ein Test, der sehr empfindlich auf Umwelteinflüsse reagiert...

Das Paradigma konditioniert Ort Präferenz (CPP) bietet eine einfache Möglichkeit zur Beurteilung des konditionierten Lohn induziert durch vielfältige Reize1,2, und wurde weitgehend verwendet, um die konditionierten lohnende Suchtgifte3 untersuchen . Es basiert auf Pawlowsche Konditionierung, Auswertung der motivationalen Wertes von Medikament verbundenen ökologischen Cues für die Aufrechterhaltung der Suchtverhalten4. In diesem Modell ökologische Hinweise sekundäre begehrliche Eigenschaften (konditionierte lohnende Effekte) zu erwerben, wenn gepaart mit einem primären Verstärker3. Beispielsweise ein zunächst neutraler Ort (z. B. die Farbe von einem Abteil in der CPP-Käfig) paart sich mit speziellen Wirkungen eines Medikaments von Missbrauch während einiger Sitzungen5, Klimaanlage, während ein weiteres Fach mit der Injektion eines Fahrzeugs verbunden ist. Klimaanlage, wenn das Tier mehr Zeit in das Fach, die zuvor mit dem Medikament verbundenen verbringt folgend wird davon ausgegangen, dass CPP3entwickelt hat. Die Einrichtung der Präferenz ist erreicht, wenn das Tier die Umwelt Cues, verbunden mit der Droge, die die primäre Verstärker ist einen positiven Wert verleiht. Infolgedessen werden Tiere Droge-suchenden Verhaltensreaktionen in Reaktion auf diese kontextuellen Signale6durchführen. Die CPP-Modell ermöglicht die Auswertung der lohnendsten Eigenschaften der Eingangssignale Dosen des Medikaments, die anzeigt, ob Tiere in einem bestimmten Zustand (z. B.zuvor von sozialen Niederlage erlitt) sind anfällig und empfindlich auf Dosen, die können nicht wirksam bei der naiven Tiere7.
CPP-Modell hat auch zur Auslöschung/Wiedereinsetzung als Tiermodell Rückfall3, zu studieren, das ist das Ziel dieses Protokolls zu bewerten. Es gibt drei verschiedene Phasen: Erwerb, vom Aussterben bedroht und Wiedereinstellung (Abbildung 1). In der CPP Wiedereinstellung Modell Tiere erwerben zunächst die CPP für ein Medikament gepaart, und dann führen sie mehrere vom Aussterben bedroht-Sitzungen. Wir definieren vom Aussterben bedroht, wie der Moment, in dem das Tier reduziert seine Verhaltensreaktionen der Annäherung an eine konditionierte lohnende Stimulus, der wurde (z. B.das Medikament entfernt)8. Während der Sitzungen vom Aussterben bedroht erkunden Tiere die Fächer in der Abwesenheit des Medikaments, so dass die erworbenen Präferenz allmählich abgeschwächte9ist. Ein wichtiges Thema zu berücksichtigen ist, dass die Verhaltensänderungen, die das Tier während vom Aussterben bedroht (die fortschreitende Abnahme in den Zeitaufwand in der Droge gepaart Fach) zeigt durch neue Lernprozesse sein kann, die mit der vorherigen erlernte Reaktion konkurrieren, oder zu einem Rückgang der interne motivationale Zustand des Thema3fällig. Schließlich wäre die Wiederherstellung der Ort-Voreinstellung durch den Kontext oder Medikament Hinweise unseres Modells der Wiedereinstellung1.
Verwaltung eine Grundierung Injektion des Medikaments verbunden kann die Präferenz, wiedereinsetzen, die eine Wiederherstellung der Annäherung an die kontextuellen Signale gilt. Medikament Priming Wiedereinstellung erfolgt durch die anhaltende Erinnerung an die angenehmen Effekte der Droge, die induzierte Begierde und motiviert Tiere, die Umwelt Cues im Zusammenhang mit Belohnung zu suchen.
Einige Vorteile des CPP Wiedereinstellung Modells sind, dass das Verfahren ist nicht-invasiv (im Gegensatz zu Selbstverwaltung, die Operation erfordert), kostengünstig und einfach. Darüber hinaus hat dieses Modell eine gutes Kriterium Gültigkeit, wie es gut imitiert, was tritt bei Menschen10,11, induzierende Wiedereinstellung mit reizen, die Rückfall, wie Re-Exposition gegenüber der Droge12,13 auslösen oder betonen Sie14.
Es gibt andere Techniken wie das Aussterben – Wiedereinsetzung Modell der intravenöse Selbstverwaltung. Hier drücken Sie Tiere einen Hebel, um das Medikament selbst verabreichen, das die Bewertung der operanten Reaktion des Tieres, Compulsivity und Motivation14,15,16erlaubt. Der größte Vorteil der KPP über Selbstverwaltung Verfahren ist, dass CPP Wiedereinsetzung gilt entsprechend die Reaktivierung der Anreiz-motivierende Wert der Kontext Stimuli gepaart mit der Droge, bestehend aus dem Wiedererscheinen des Ansatzes Verhalten, die Kontext-17. Darüber hinaus können nicht-medikamentöse Reize wie Stress, auch Wiedereinstellung18,19induzieren. Zum Beispiel beschrieben eine Selbstverwaltung Studie keine Auswirkungen auf die Wiedereinführung der Heroin-Aufnahme bei Ratten nach einem Fuß Schock oder Zurückhaltung betonen20. Autoren diskutiert, dass es nicht erfolgreich war, weil diese Stressoren außerhalb der Selbstverwaltung Kammer in einem anderen Zusammenhang getestet wurden. Im Gegensatz dazu Wenn Sie die CPP-Modell der Wiedereinstellung zu verwenden, gab es eine klare Wiedereinsetzung in den vorigen Morphin-induzierte CPP nach der Verwendung der gleichen Stressoren und in einem anderen Kontext auf, der KPP und zu unterschiedlichen Zeiten angewendet (0 und 15 min nach stress Exposition)18 .
Mehrere Studien in der Literatur haben verschiedene Arten von Drogen- und Stress-induzierte Wiedereinstellung gezeigt. Auf der einen Seite wurde bei Ratten und Mäusen mit Morphin5,21,22,23, Kokain24,25, Amphetamin26Medikamenten-induzierten Wiedereinstellung berichtet, 27, Ethanol28,29und 3,4-Methylendioxymethamphetamin (MDMA)30. Auf der anderen Seite möglicherweise Exposition gegenüber betonen ein entscheidender Faktor bei Anfälligkeit für Drogenmissbrauch. Stress ist bekanntermaßen die lohnenden Effekte von Drogen7,31,32 zu erhöhen und ihre Rolle in der Rückfall ist gut etablierte33,34. Niederlage in sozialen Interaktionen mit ein Artgenosse werden z. B. Morphium und Kokain CPP18,19wiederhergestellt. Darüber hinaus Tieren wiederholt soziale Niederlage sind anfälliger für die konditionierten lohnende Effekte der Eingangssignale Dosen von Kokain, und die Präferenz mit sehr niedrigen Dosen von Kokain7wieder.
Anwendung des Modells CPP Wiedereinstellung ist eine nützliche und sensible Art, Anfälligkeit für Rückfälle bei Tieren zu bewerten, und ermöglicht die Bewertung der verschiedenen feinstofflichen Umwelt Manipulationen, die Hauptauslöser sind, die menschliche Rückfall, wie z. B. bedrohen Drogen oder Stress-induzierte Wiedereinstellung.

<table><tbody><tr><td>MONPRE 2Z software</td><td>CIBERTEC S.A., Spain</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.</td><td>CIBERTEC S.A., Spain</td><td>N/A</td><td>The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.</td></tr><tr><td>Cocaine hydrochloride</td><td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Animals: mice of the OF1 outbred strain</td><td>Charles River, Barcelona Spain</td><td>N/A</td><td>Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.</td></tr><tr><td>Standard Diet- Teklad Global Diet 2014</td><td>Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)</td><td></td><td>13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g</td></tr><tr><td>High fat diet TD.06415</td><td></td><td></td><td>45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g</td></tr></tbody></table>

reinstatement of drug-seeking in mice using the conditioned place preference paradigm

Dieses Protokoll beschreibt bedingt Platz Präferenz (CPP) als Modell für einen Rückfall in die Drogensucht. In diesem Modell Tiere sind zunächst darauf trainiert, klimatisierten Ort bevorzugt in einem Medikament gepaart Fach erwerben und nach dem Post-Klimaanlage-Test führen sie mehrere Sitzungen, um die etablierten Präferenz zu löschen. Die CPP erlaubt die Auswertung der konditionierten lohnende Effekte von Drogen im Zusammenhang mit ökologischen Cues. Dann kann erloschene CPP robust durch die nicht-Kontingent-Verwaltung einer Grundierung Dosis des Medikaments, und durch die Einwirkung von belastenden Reize wieder eingesetzt werden. Beide Methoden werden hier erklärt. Wenn das Tier die Verhaltensreaktion reinitiates, gilt eine Wiedereinsetzung der konditionierten Belohnung stattgefunden haben.
Die wichtigsten Vorteile dieses Protokolls sind, dass es nicht-invasive, kostengünstig und einfach mit guten Validitätskriterien ist. Darüber hinaus ermöglicht es das Studium der verschiedenen ökologischen Manipulationen, wie Stress oder Ernährung, die Rückfall in Drogen sucht Verhalten modulieren kann. Eine Einschränkung ist jedoch, dass wenn der Forscher die Motivation und primäre verstärkende Wirkung des Medikaments zu erkunden soll, mit Selbstverwaltung Verfahren ergänzt werden sollte, da sie operante Reaktionen der Tiere beteiligen.

Erstens sind repräsentative Ergebnisse aus der Grundierung und Stress-induzierte Wiedereinsetzung in Abbildung 7 dargestellt mit Hilfe von Erwachsenen OF1 männlichen Mäusen.
Die Daten in Abbildung 7-b für Zeit verbracht in der Droge gepaart Kompartiments in der Pre- und Post-C Test wurden mit einer Messwiederholung ANOVA mit einer innerhalb der Them...

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Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Dieses Protokoll beschreibt bedingt Platz Präferenz (CPP) als Modell für einen Rückfall. Dieses Verfahren ermöglicht die Messung von Rückfällen bei Versuchstieren, unter Berücksichtigung der Auswirkungen der Droge verbundenen ökologischen Cues als Begierde und Rückfall in Verzicht Süchtige steht derzeit im Mittelpunkt der Drogenmissbrauch Behandlungsprogramme.

Wiedereinführung der Drug-seeking bei Mäusen mit dem klimatisierten Ort Präferenz Paradigma

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

reinstatement-drug-seeking-mice-using-conditioned-place-preference

Universidad de Cartagena UDEC

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Behavior

Unit 1

Pharmacotherapy of Depression and Anxiety Disorders

SCIENTISTS IN ACTION

11.4K Aufrufe.  Universitat de València. Dieses Protokoll beschreibt bedingt Platz Präferenz (CPP) als Modell für einen Rückfall. Dieses Verfahren ermöglicht die Messung von Rückfällen bei Versuchstieren, unter Berücksichtigung der Auswirkungen der Droge verbundenen ökologischen Cues als Begierde und Rückfall in Verzicht Süchtige steht derzeit im Mittelpunkt der Drogenmissbrauch Behandlungsprogramme.

Serie: Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Stereotaxic Microinjection of Viral Vectors Expressing Cre Recombinase to Study the Role of Target Genes in Cocaine Conditioned Place Preference

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes of interest allows for enhanced temporally- and regionally-specific control of gene deletion, compared to existing methods. While conditional deletion can also be achieved by mating mice that express Cre recombinase under the control of specific gene promoters with mice carrying a floxed gene, stereotaxic microinjection allows for targeting of discrete brain areas at experimenter-determined time points of interest. In the context of cocaine conditioned place preference, and other cocaine behavioral paradigms such as self-administration or psychomotor sensitization that can involve withdrawal, extinction and/or reinstatement phases, this technique is particularly useful in exploring the unique contribution of target genes to these distinct phases of behavioral models of cocaine-induced plasticity. Specifically, this technique allows for selective ablation of target genes during discrete phases of a behavior to test their contribution to the behavior across time. Ultimately, this understanding allows for more targeted therapeutics that are best able to address the most potent risk factors that present themselves during each phase of addictive behavior.

This article describes how to microinject viral vectors into mouse brain and then test in a conditioned place preference paradigm that includes an acquisition, extinction and reinstatement phase.

Stereotaktische Mikroinjektion von viralen Vektoren ausdrücken Cre-Rekombinase, um die Rolle der Zielgene in Cocaine konditionierte Platzpräferenz Studieren

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes ...

Forschung

Verhalten

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats 

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse. Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the neurobiology and phenomenology of relapse to drug use. Although procedural variations have emerged over the past several decades, the most conventional reinstatement procedures are based on the drug self-administration (SA) model. In this model, an animal is trained to perform an operant response to obtain drug. Subsequently, the behavior is extinguished by withholding response-contingent reinforcement. Reinstatement of drug seeking is then triggered by a discrete event, such as an injection of the training drug, re-exposure to drug-associated cues, or exposure to a stressor 1.
Reinstatement procedures were originally developed to study the ability of acute non-contingent exposure to the training drug to reinstate drug seeking in rats and monkeys 1, 2. Reinstatement procedures have since been modified to study the role of environmental stimuli, including drug-associated cues and exposure to various forms of stress, in relapse to drug seeking 1, 3, 4.
Over the past 15 years, a major focus of the reinstatement literature has been on the role of stress in drug relapse. One of the most commonly used forms of stress for studying this relationship is acute exposures to mild, intermittent, electric footshocks. The ability of footshock stress to induce reinstatement of drug seeking was originally demonstrated by Shaham and colleagues (1995) in rats with a history of intravenous heroin SA5. Subsequently, the effect was generalized to rats with histories of intravenous cocaine, methamphetamine, and nicotine SA, as well as oral ethanol SA 3, 6.
Although footshock-induced reinstatement of drug seeking can be achieved reliably and robustly, it is an effect that tends to be sensitive to certain parametrical variables. These include the arrangement of extinction and reinstatement test sessions, the intensity and duration of footshock stress, and the presence of drug-associated cues during extinction and testing for reinstatement. Here we present a protocol for footshock-induced reinstatement of cocaine seeking that we have used with consistent success to study the relationship between stress and cocaine seeking.

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the role of stress in relapse to drug seeking. Here, we report on a method for inducing the reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats via acute exposures to mild, intermittent electric footshock.

Ein Verfahren zur Untersuchung der Fußschock-Induced Wiedereinsetzung von Kokain suche in Laborratten

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Neurowissenschaften

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate drug-seeking behavior and prompt relapse in abstinent drug users. We have developed a procedure to study the behavioral and neural processes that mediate the impact of context on alcohol-seeking behavior in rats. Following acclimation to the taste and pharmacological effects of 15% ethanol in the home cage, male Long-Evans rats receive Pavlovian discrimination training (PDT) in conditioning chambers. In each daily (Mon-Fri) PDT session, 16 trials each of two different 10 sec auditory conditioned stimuli occur. During one stimulus, the CS+, 0.2 ml of 15% ethanol is delivered into a fluid port for oral consumption. The second stimulus, the CS-, is not paired with ethanol. Across sessions, entries into the fluid port during the CS+ increase, whereas entries during the CS- stabilize at a lower level, indicating that a predictive association between the CS+ and ethanol is acquired. During PDT each chamber is equipped with a specific configuration of visual, olfactory and tactile contextual stimuli. Following PDT, extinction training is conducted in the same chamber that is now equipped with a different configuration of contextual stimuli. The CS+ and CS- are presented as before, but ethanol is withheld, which causes a gradual decline in port entries during the CS+. At test, rats are placed back into the PDT context and presented with the CS+ and CS- as before, but without ethanol. This manipulation triggers a robust and selective increase in the number of port entries made during the alcohol predictive CS+, with no change in responding during the CS-. This effect, referred to as context-induced renewal, illustrates the powerful capacity of contexts associated with alcohol consumption to stimulate alcohol-seeking behavior in response to Pavlovian alcohol cues.

A procedure to study the capacity of an alcohol associated environmental context to trigger the renewal of alcohol-seeking behavior in rats is described.

Eine Vorgehensweise, um Context-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht bei Ratten Verhalten beobachten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Operant Sensation Seeking in the Mouse

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior. These 'self-administration' methods have been used extensively in drug addiction research due to their high construct validity. Operant studies provide researchers a tool for preclinical investigation of several aspects of the addiction process. For example, mechanisms of acute reinforcement (both drug and non-drug) can be tested using pharmacological or genetic tools to determine the ability of a molecular target to influence self-administration behavior1-6. Additionally, drug or food seeking behaviors can be studied in the absence of the primary reinforcer, and the ability of pharmacological compounds to disrupt this process is a preclinical model for discovery of molecular targets and compounds that may be useful for the treatment of addiction3,7-9. One problem with performing intravenous drug self-administration studies in the mouse is the technical difficulty of maintaining catheter patency. Attrition rates in these experiments are high and can reach 40% or higher10-15. Another general problem with drug self-administration is discerning which pharmacologically-induced effects of the reinforcer produce specific behaviors. For example, measurement of the reinforcing and neurological effects of psychostimulants can be confounded by their psychomotor effects. Operant methods using food reinforcement can avoid these pitfalls, although their utility in studying drug addiction is limited by the fact that some manipulations that alter drug self-administration have a minimal impact on food self-administration. For example, mesolimbic dopamine lesion or knockout of the D1 dopamine receptor reduce cocaine self-administration without having a significant impact on food self-administration 12,16. 
Sensory stimuli have been described for their ability to support operant responding as primary reinforcers (i.e. not conditioned reinforcers)17-22. Auditory and visual stimuli are self-administered by several species18,21,23, although surprisingly little is known about the neural mechanisms underlying this reinforcement. The operant sensation seeking (OSS) model is a robust model for obtaining sensory self-administration in the mouse, allowing the study of neural mechanisms important in sensory reinforcement24. An additional advantage of OSS is the ability to screen mutant mice for differences in operant behavior that may be relevant to addiction. We have reported that dopamine D1 receptor knockout mice, previously shown to be deficient in psychostimulant self-administration, also fail to acquire OSS24. This is a unique finding in that these mice are capable of learning an operant task when food is used as a reinforcer. While operant studies using food reinforcement can be useful in the study of general motivated behavior and the mechanisms underlying food reinforcement, as mentioned above, these studies are limited in their application to studying molecular mechanisms of drug addiction. Thus, there may be similar neural substrates mediating sensory and psychostimulant reinforcement that are distinct from food reinforcement, which would make OSS a particularly attractive model for the study of drug addiction processes. The degree of overlap between other molecular targets of OSS and drug reinforcers is unclear, but is a topic that we are currently pursuing. While some aspects of addiction such as resistance to extinction may be observed with OSS, we have found that escalation 25 is not observed in this model24. Interestingly, escalation of intake and some other aspects of addiction are observed with self-administration of sucrose26. Thus, when non-drug operant procedures are desired to study addiction-related processes, food or sensory reinforcers can be chosen to best fit the particular question being asked. 
In conclusion, both food self-administration and OSS in the mouse have the advantage of not requiring an intravenous catheter, which allows a higher throughput means to study the effects of pharmacological or genetic manipulation of neural targets involved in motivation. While operant testing using food as a reinforcer is particularly useful in the study of the regulation of food intake, OSS is particularly apt for studying reinforcement mechanisms of sensory stimuli and may have broad applicability to novelty seeking and addiction.

In this protocol we describe a method of operant learning using sensory stimuli as a reinforcer in the mouse. It requires no prior training or food restriction, and it allows the study of motivated behavior without the use of a pharmacological or natural reinforcer such as food.

Operante Sensation Seeking in der Maus

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior.  These 'self-administration' methods have been used extensively in drug ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to drugs of abuse make lasting alterations in the brain function of vulnerable individuals, and these persistent alterations likely serve to maintain the maladaptive drug seeking and taking behaviors characteristic of addiction/dependence2. In rodents, reward experience and contextual associations are frequently measured using the conditioned place preference assay, or CPP, wherein preference for a previously drug-paired context is measured. Behavioral sensitization, on the other hand, is an increase in a drug-induced behavior that develops progressively over repeated exposures. Since sensitized behaviors can often be measured after several months of drug abstinence, depending on the dose and length of initial exposure, they are considered observable correlates of lasting drug-induced plasticity. Researchers have found these assays useful in determining the neurobiological substrates mediating aspects of addiction as well as assessing the potential of different interventions in disrupting these behaviors. This manuscript describes basic, effective protocols for mouse CPP and locomotor behavioral sensitization to cocaine.

This protocol is intended to enable researchers to conduct experiments designed to test these aspects of addiction using the conditioned place preference and locomotor behavioral sensitization assays.

Bewertung der Kokain-induzierte Behavioral Sensibilisierung und konditionierten Platzpräferenz bei Mäusen

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Eine konditionierte Ort Präferenz Protokoll zur Messung der Inkubation des Verlangens bei Ratten

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with drug-taking. This model has been implemented in experiments using different types of substances of abuse such as methamphetamine, cocaine, and alcohol. However, punishment-induced abstinence in heroin-trained animals has not been demonstrated. Furthermore, acute stress is a key trigger for relapse in humans and animal models. It was previously demonstrated that acute food deprivation robustly induced reinstatement of extinguished cocaine and heroin seeking. The procedure described here can be used to assess the effects of acute stress exposure on heroin seeking after punishment-imposed abstinence. A total of 8 rats were implanted with chronic intravenous (i.v.) catheters and trained to self-administer heroin (0.1 mg/kg/infusion) for 18 days under a seek-take chained schedule. Completing the seek link gave access to the take lever, which was paired with a heroin infusion. The seek lever was programmed with a variable interval 60 schedule of reinforcement (VI60), and the take lever was programmed with a fixed-ratio 1 reinforcement schedule (FR1). Following self-administration training, a mild foot shock was delivered on 30% of the completed seek links instead of the extension of the take lever. Footshock intensity was increased by 0.1 mA per daily session from 0.2 mA to 1.0 mA. Heroin-seeking tests were performed after 24 h of food deprivation (FD) or sated conditions. Rats under acute food deprivation condition robustly increased heroin seeking after punishment-imposed abstinence.

A procedure that demonstrates a robust acute food deprivation-induced relapse to heroin seeking after punishment-imposed abstinence is described. A punishment-imposed abstinence model was successfully implemented using the seek and take chain schedule for heroin self-administration. Heroin-seeking tests are then performed following 24 h of food-deprivation stress.

Ein Verfahren zur Untersuchung des stressinduzierten Rückfalls der Heroinsuche nach strafbedingter Abstinenz

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue reactivity, the sensitivity to cues previously linked with the drug-taking experience, plays a prominent role in human craving during abstinence. Cue reactivity can be assessed as the attentional orientation toward drug-associated cues that is measurable as appetitive approach behavior in both preclinical and human studies. Herein describes an assessment of cue reactivity in rats trained to self-administer cocaine. Cocaine self-administration is paired with the presentation of discrete cues that act as conditioned reinforcers (i.e., house light, stimulus light, infusion pump sounds). Following a period of abstinence, lever presses in the cocaine self-administration context accompanied by the discrete cues previously paired with cocaine infusion are measured as cue reactivity. This model is useful to explore neurobiological mechanisms underlying cue reactivity processes as well as to assess pharmacotherapies to suppress cue reactivity and therefore, modify relapse vulnerability. Advantages of the model include its translational relevance, and its face and predictive validities.&#160;The primary limitation of the model is that the cue reactivity task can only be performed infrequently and must only be used in short duration (e.g., 1 hour), otherwise rats will begin to extinguish the pairing of the discrete cues with the cocaine stimulus. The model is extendable to any positively reinforcing stimulus paired with discrete cues; though particularly applicable to drugs of abuse, this model may hold future applications in fields such as obesity, where palatable food rewards can act as positively reinforcing stimuli.

Cue reactivity is conceptualized as sensitivity to cues linked with drug-taking experiences that contribute to craving and relapse in abstinent humans. Cue reactivity is modeled in rats by measuring attentional orientation toward drug-associated cues that results in appetitive approach behavior in a cue reactivity test following self-administration and forced abstinence.

Ein Protokoll für die Messung von Cue Reaktivität in einem Rattenmodell der Kokain-Gebrauch-Störung

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Using Optogenetics to Reverse Neuroplasticity and Inhibit Cocaine Seeking in Rats

This protocol demonstrates the steps needed to use optogenetic tools to reverse cocaine-induced plasticity at thalamo-amygdala circuits to reduce subsequent cocaine seeking behaviors in the rat. In our research, we had found that when rats self-administer intravenous cocaine paired with an audiovisual cue, synapses formed at inputs from the medial geniculate nucleus of the thalamus (MGN) onto principal neurons of the lateral amygdala (LA) become stronger as the cue-cocaine association is learned. We hypothesized that reversal of the cocaine-induced plasticity at these synapses would reduce cue-motivated cocaine seeking behavior. In order to accomplish this type of neuromodulation in vivo, we wanted to induce synaptic long-term depression (LTD), which decreases the strength of MGN-LA synapses. To this end, we used optogenetics, which allows neuromodulation of brain circuits using light. The excitatory opsin oChiEF was expressed on presynaptic MGN terminals in the LA by infusing an AAV containing oChiEF into the MGN. Optical fibers were then implanted in the LA and 473 nm laser light was pulsed at a frequency of 1 Hz for 15 minutes to induce LTD and reverse cocaine induced plasticity. This manipulation produces a long-lasting reduction in the ability of cues associated with cocaine to induce drug seeking actions.

The methods described here outline a procedure used to optogenetically reverse cocaine-induced plasticity in a behaviorally-relevant circuit in rats. Sustained low-frequency optical stimulation of thalamo-amygdala synapses induces long-term depression (LTD). In vivo optogenetically-induced LTD in cocaine-experienced rats resulted in the subsequent attenuation of cue-motivated drug seeking.

Verwendung von Optogenetik zur Umkehrung der Neuroplastizität und zur Hemmung der Kokainsuche bei Ratten

This protocol demonstrates the steps needed to use optogenetic tools to reverse cocaine-induced plasticity at thalamo-amygdala circuits to reduce ...

Self-administration Studies

Behavioral reinforcement induced by the rewarding feelings following substance use sometimes leads to addiction, which is demonstrated by increased self-administration. Drug self-administration studies in rodents model human behavior during drug abuse. These models are useful in understanding the neurobiological behavior of addiction in order to help scientists discover new treatments for drug dependence.
This video reviews the concepts underlying self-administration studies. A general protocol of self-administration is discussed, which includes description of necessary equipment and different routes of administration commonly employed. Some modified protocols used to model more complex aspects of addiction, such as progressive ratio schedule and extinction, are also explained. Finally, experiments conducted in current addiction research labs will be examined.

Self-administration Studies: Principle and Protocol

Studien zur Selbstmedikation

Behavioral reinforcement induced by the rewarding feelings following substance use sometimes leads to addiction, which is demonstrated by increased ...