该协议详细说明了床边RCM和RCM-OCT设备的图像采集步骤。获得高质量的图像对于正确诊断和管理皮肤病变至关重要。这些设备在体内以组织病理学分辨率对皮肤进行成像，在检测早期皮肤癌的同时节省了不必要的良性活检。
诊断在床边进行，减少了患者的等待时间和焦虑。使用该显微镜成像有助于我们在床边无创地指导患者皮肤病变和皮肤癌的检测和诊断。此外，成像有助于我们将皮肤病变分为浅表病变和深层病变，这有助于指导治疗。
因此，成像有助于我们将诊断和治疗整合或结合到单个患者就诊中，现在被称为一站式患者护理范式。除了使用成像来检测和诊断皮肤病变和皮肤癌外，我们还使用成像来指导患者口腔病变和口腔癌的检测和诊断。演示该程序的将是我实验室的组织技术员Ucalene Harris女士。
首先，对于位于皮肤平坦表面（例如躯干和四肢）上的病变，选择 WP-RCM 设备，为弯曲表面（如鼻子、耳垂、眼睑和生殖器）上的病变选择 HH-RCM 设备。对于影像学检查，将患者放在完全倾斜的椅子或有支撑的平坦检查台上。然后用酒精擦拭巾清洁病变和周围皮肤。
在塑料窗的中心加入一滴矿物油，然后小心地将其铺在窗宽上。从窗户的粘合剂侧取下平装书，轻轻拉伸皮肤，然后装上窗户。要使用WP-RCM设备获取图像，请将探头垂直于病变放置。
然后通过将WP-RCM探头悬停在塑料窗盖上来获取皮肤镜图像，并估计探头的最佳插入角度。将位于探头侧面的白色小箭头与皮肤镜相机侧面的箭头对齐。将皮肤镜相机插入塑料窗盖。
确保皮肤镜图像覆盖整个病变表面，然后按下相机上的触发器以获取图像。然后取下皮肤镜。然后将豌豆大小的超声波凝胶放入一次性塑料窗盖内。
将 RCM 探头插入塑料一次性盖子，直到听到尖锐的咔嗒声。使用在上一步中获得的皮肤镜图像，选择病变的中心并确定皮肤的最顶层或最亮层，即角质层的无核层。在此级别将成像深度设置为零。
按堆栈图标以获取病变中心的堆栈。从下拉菜单中，选择一个解剖部位，面部或身体。将步长设置为 4.5 微米，深度设置为 250 微米。
识别堆栈中的真皮-表皮连接或 DEJ 层，然后选择一个 8x8 毫米的正方形来覆盖整个病变。然后按马赛克图标在 DEJ 处获取第一个马赛克。要获取后续马赛克，请单击 DEJ 马赛克上的结构以在实时取景中查看它。
从 DEJ 向下滚动以获取真皮处的马赛克，然后从 DEJ 向上滚动以获取表皮中的马赛克。在皮肤镜检查中以均匀的模式捕获每个象限中的一个堆栈，在病变中心捕获一个堆栈，或获取用于异质性病变的其他堆栈。完成图像会话后，拆下显微镜镜头周围的保护锥。
用酒精棉签清洁物镜尖端并擦干物镜。将塑料锥体重新连接到显微镜探头上。要生成共聚焦诊断评估报告，请单击"新建评估"。
从下拉菜单中的预选选项中输入诊断。从报告清单中选择成像期间看到的特征，然后选择适用的管理。单击完成并签名。
将报告生成为 PDF 并打印出来。要使用 HH-RCM 设备获取图像，请首先定位患者并清洁病变部位，然后用纸环圈出病变。将豌豆大小的超声凝胶涂在HH-RCM的物镜上，并用塑料盖盖住它。
在塑料盖的侧面添加大量矿物油，该塑料盖将接触皮肤。用力按压将探头按压到皮肤上的病变侧。使用 HH-RCM 设备上的 Z 深度控件在病变内的不同深度上下移动。
在感兴趣区域中获取多个单帧图像和堆栈。对于较大的病变，通过将 HH-RCM 探头移动到整个病变表面上并单击视频捕获符号，在各个层拍摄连续视频。记录血管内血细胞的运动。
映像会话完成后，按完成映像。用酒精棉签清洁病变，从探头的物镜上取下超声凝胶，然后重新安装塑料盖。对患者进行影像学检查，并确保病变边界没有过多的毛发和局部杂质。
按照上一节所述准备探头后，单击"成像设置"。选择线成像模式以获取 RCM 图像。将步长设置为 5 微米，将步数设置为 40。
通过单击"抓取"获取上一节中所示的堆栈。然后点击 冻结 完成后的按钮。单击成像设置并选择光栅模式以获取病变结构的相关 OCT 视频。
切换到技术人员选项卡。完成后，单击"抓取"按钮，然后立即按"保存"按钮。使用该协议，在皮肤的相关深度获取高质量的RCM图像。
应避免出现气泡、表面碎屑和运动伪影等妨碍诊断评估的伪影。在RCM上，观察到各种皮肤层，例如由无核角质形成细胞组成的角膜层和由紧密堆积的有核细胞组成的棘层，具有明亮的细胞质，形成典型的蜂窝状图案。接下来是基底层，由基底角质形成细胞的黑色素帽形成的鹅卵石图案识别。
DEJ的特点是明亮的环状图案。状真皮由明亮的胶原纤维和血管组成。常见皮肤癌（如基底细胞癌）的RCM图像显示肿瘤结节伴有裂隙和栅栏。
鳞状细胞癌呈非典型蜂窝状和扣眼血管。黑色素瘤在表皮中显示明亮的大圆形页状细胞簇。对于基底细胞癌，RCM图像无法显示明确的肿瘤结节。
而由堆栈和光栅解释的RCM-OCT图像显示与表皮相连的明显灰色肿瘤结节，以及裂隙和增厚的胶原蛋白束。H&E染色活检证实了诊断。通过WP-RCM成像从五层皮肤中获取诊断质量的马赛克非常重要。
使用 HH-RCM 拍摄流畅的视频和堆栈，并使用 RCM-OCT 设备在同一区域中拍摄堆栈和光栅。
