使用24小时器官保存和连续遥测的猪模型中正交肾自动移植

该协议描述了利用24小时的器官保存时间和术外遥测监测成功建立猪正畸肾自动移植模型的所有关键步骤。这种大型动物自移植模型的主要优点是手术解剖和病理生理与临床环境相似。我们的团队在大学医院RWTH亚琴将演示的程序。

在确认过夜禁食的成年雌猪中适当的水平后，在腹股沟中进行三到五厘米切口，以360度的方式解剖股动脉。使用数字 11 手术刀进行动脉切除术，并插入遥测设备的动脉传感器。在左侧侧翼制作皮下袋后，将遥测转发器隧道进入齿面，用 3-O 聚丙烯单节缝合固定到肌肉筋膜上。

接下来，在胸部的左右两侧做两个小切口，将红白心电图电极隧道到指定位置。当电极已固定后，开始注册遥测数据。在获得稳定的信号后，用缝合线和喷雾膜敷料关闭腹股沟切口，并在动物身上放置一件适当大小的猪夹克。

第一次手术后14天，在麻醉动物右侧的壶槽上切开四到五厘米的切口，解剖皮下和肌肉组织，以暴露杂耍静脉。使用剥离板介绍器或 Seldinger 方法插入导管。用 5-0 聚丙烯缝合线固定导管，并在两层内关闭切口。

在手术消毒和无菌拖拉后，进行中等腹腔切除术以打开腹部，并使用标准的腹部缩回器暴露手术场。打开肾上腺层，使用单极烧灼、双极钳和细剪刀从任何粘附组织中解剖左肾和尿尿器。然后使用 3-0 聚乳胶缝合线来起压，并分割左尿尿器至少 10 厘米的深肠到肾。

要取回移植肾脏，使用血管夹关闭主动脉和静脉靠近主动脉和静脉。切开蛤上面的容器然后将肾脏给后表团队进行额外的准备，并使用 5-0 聚丙烯缝合线关闭肾动脉和肾静脉的树桩。

取回后立即使用标准的 14 量表外围导管对肾脏动脉进行导管，并使用至少 500 毫升的冰冷器官保护溶液冲洗肾脏。冲洗后，用计算机控制的冷却回路将移植物包裹在无菌器官袋中，储存在器官保存溶液中，目标冷缺血时间为24小时，温度为4摄氏度。血管夹紧前两到五分钟，静脉注射100国际单位每公斤肝素，然后取出反边右肾，如证明，并重新打开中位腹腔切除术。

血管夹紧前两到五分钟，静脉注射100国际单位每公斤肝素，然后取出反边右肾，如证明。将保存的移植肾脏放入手术领域，并启动以每分钟0.1至1微克为去甲肾上腺素的连续输注，使用平均动脉血压和心率监测效率。对于肾静脉的端到端的动脉瘤，使用5-0聚丙烯放置两个角缝，并连续缝合后壁。

完成后壁后，使用颅角缝合的一端，以颅骨方向缝合前壁，并用每毫升肝素盐水溶液 100 国际单位冲洗静脉。对于肾动脉的端到端脑膜病，使用6-0聚丙烯颅角缝合，然后再使用降落伞技术，以连续的方式缝合后壁，如证明。用双武装 6-0 聚丙烯缝合的另一端缝合前壁，用每毫升肝素盐水溶液用 100 个国际单位冲洗动脉。

脑膜切除术完成后，将两个线系在胸腺角，并依次打开静脉血管和动脉夹，以允许肾脏重新灌注。再灌注后，在肾动脉外壁上进行五毫升的木瓜，静脉注射250毫升20%葡萄糖溶液，单一剂量为80毫克的Furosemide。接下来，通过12个法国小儿尿导管通过腹壁和皮肤，并使用连字固定导管到尿导管。

关闭肾脏上膜层，以防止移植物脱位和血管肛门瘤的扭结。并关闭腹部在四层，如证明。最后，使用彩色多普勒超声波，以确保肾脏移植的充分动脉和静脉灌注，然后再返回完全卧式动物到住房设施。

在这组具有代表性的五项猪正畸肾脏自动移植实验中，转发器植入和自动移植程序在每只动物中都取得了成功，在观察期内记录了足够的遥测信号。腹部闭合后，彩色多普勒超声波显示，在所有情况下肾脏有令人满意的动脉和静脉灌注。血清钾和肌酸值在术后三至四天见顶，之后显示逐渐恢复。

血液pH值保持在正常范围内，术后前四天的尿液输出恢复到正常值。该协议可用于回答有关器官保护技术或前体内或体内疗法在临床上重要的大型动物模型中的影响的各种问题。