استخراج الدم الديناميكي المستمر من قلب الفئران عبر تقنية غسيل الكلى المجهري غير الباضعة

تعد تقنيتنا الديناميكية المستمرة لجمع الدم من قلب الفئران مهمة جدا لتحليل مكونات الدم ، مما يساهم في فهم أمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض المرتبطة بها. بالمقارنة مع طرق أخذ العينات التقليدية ، تتمتع هذه التقنية بمزايا في الجسم الحي ، في الوقت الفعلي ، ديناميكية ، وغير جراحية ، مع عدم وجود جزيئيات بيولوجية دقيقة ومعالجة مسبقة لعينة العيار لاختبار أجنبي. لا تنطبق هذه التقنية على أمراض القلب والأوعية الدموية فحسب ، بل يجب أن تعمل أيضا على تشخيص الأمراض وعلاجها من خلال الكشف عن المؤشرات الحيوية للدم جنبا إلى جنب مع الكروماتوغرافيا السائلة عالية المرحلة وقياس الطيف الكتلي.

يمكن استخدام هذه الطريقة للتحقيق في أمراض القلب والأوعية الدموية مثل احتشاء عضلة القلب وانقطاع النفس وتصلب الشرايين. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه ينطبق أيضا على الوذمة الرئوية القلبية والانسداد الرئوي والدماغي. بعد القيام بالتحضير التجريبي ، قم بتوصيل مدخل مسبار وحدة غسيل الكلى بإبرة المحقنة ومحول الأنبوب وأنبوب FEP.

تحقق من سالكية نظام أنابيب غسيل الكلى عن طريق تعطير محلول سكر العنب المضاد للتخثر في نظام الأنابيب. قم بعمل شق لكشف الوريد الوداجي الأيمن عن طريق تشريح حاد للأنسجة الرخوة واللفافة المحيطة بالأوعية. باستخدام خياطة جراحية 4-0 ، قم بعمل عقدة انزلاقية قابلة للفصل في الوريد الوداجي الأيمن في الطرف البعيد من القلب لمنع تدفق الدم مؤقتا.

ثم قم بعمل شق في الوريد الوداجي الأيمن بالقرب من القلب. أدخل قسطرة على شكل إبرة في الوريد الوداجي الأيمن باتجاه الطرف القريب من قلب الفئران. أدخل مسبار غسيل الكلى المجهري في الدم في قسطرة وزرع المسبار بملقط عيني على طول الشق المائل لنمط القسطرة.

قم بإزالة نمط القسطرة الموجهة واغمر الغشاء شبه المنفذ للمسبار بالكامل في الوريد الوداجي الأيمن. اكشف العقدة المنزلقة القابلة للفصل في الطرف البعيد من القلب لاستعادة تدفق الدم في الوريد الوداجي الأيمن. ثم استخدم 4-0 خيوط جراحية لربط المسبار بالوريد الوداجي الأيمن.

ضع الجرذ المستيقظ في خزان حر الحركة وقم بتوصيل المسبار بنظام غسيل الكلى الدقيق. ثم قم بري محلول سكر العنب المضاد للتخثر بمعدل ميكرولتر في الدقيقة لمدة ساعة واحدة لموازنة غشاء غسيل الكلى للمسبار. اجمع عينات دم غسيل الكلى الدقيقة واحتفظ بها مؤقتا في حاوية كسرية تبلغ أربع درجات مئوية.

لإعادة تأكيد أن المسبار في الوريد الوداجي الأيمن ، قم بتشريح الفئران. قم بإزالة مسبار غسيل الكلى الدقيق من الوريد الوداجي الأيمن وضعه في ماء فائق النقاء. قم بتوصيل المسبار بخط الأنابيب واشطفه طوال الليل بماء فائق النقاء لغسل الملح المتبقي في الأنبوب والتحقيق فيه تماما.

ظهرت عينات الدم الطبيعية باللون الأحمر الفاتح بينما لوحظت جلطات دموية محتملة في عينات نقص الأكسجين. كانت العينات التي تم الحصول عليها من خلال تقنية غسيل الكلى في الدم عديمة اللون وواضحة وشفافة. لتجنب تدمير الغشاء ومسبار الانزلاق أو الإزاحة ، يجب أن ننتبه عندما نضع المسبار ونغمره في الوريد الوداجي للفئران.

يمكن استخدام عينات الدم التي تم الحصول عليها من خلال تقنية غسيل الكلى الدقيق لتحليل المؤشرات الحيوية للأمراض المختلفة وتوزيع الدم للأدوية والمستقلبات النادرة.