تسجيل واحد الألياف يلعب دورا هاما في تسجيل أنشطة الألياف العصبية. خصوصا الأنشطة التي تنقل الإحساس المحيطي من الحقول تقبلا للخلايا العصبية في العقدة جذر الظهرية. في wavel من تسجيل الألياف، ويوفر طول المدة الزمنية مع القدرة على تسجيل الردود على المحفزات الطبيعة، وكان في وقت لاحق اضطراب البيئة بين الخلايا.
في تسجيل واحد من الألياف يتطلب النيوترونات التلقائي جيد لهذا الوضع. المعالج يدعو شرط لإعداد اختبارات DRG متكاملة يتم دمج العصب الوركي. نتيجة الوضع التجريبي يظهر تقريبا جميع تفاصيل الأعصاب في مرحلة جيدة، والشارات المادية.
وثالثا ، كامل إعداد DRG كما هي متكاملة. لبدء هذا الإجراء، قم بإعداد وتطهير جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة. ثم قم بإعداد 1 إلى 2 لتر من محلول Ringer العادي خارج الخلية وتخزينه عند أربع درجات مئوية حتى الاستخدام.
لفضح جذع العصب الوركي للتسجيل، أولا، قطع فتح الجلد الجرذ تخدير والعضلات على الجزء الظهري من الفخذ. ثم، إجراء تشريح حادة على طول العضلة ذات الرأسين الفخذ. عزل بعناية جذع العصب الوركي باستخدام مقص العيون وإبرة فصل الزجاج، والحفاظ على الأنسجة رطبة باستخدام حل رينجر.
بعد ذلك ، قم بإصلاح الحيوان على طوق معدني منزلي الصنع عن طريق خياطة الجلد في الفتحة المحيطة به. سحب الجلد قليلاً لإنشاء حمام السوائل. تعرض سنتيمتر واحد من جذع العصب الوركي على الجانب القريب.
ضع منصة صغيرة بنية تحت جذع العصب لتعزيز التباين من أجل مراقبة جذع العصب الناعم بشكل واضح. في وقت لاحق، وتطبيق بعض البارافين السائل الدافئ على الجزء العلوي من جذع العصب لمنع تجفيف سطح الألياف. إزالة السائل إذا كان هناك نضح حول الجذع العصبي.
لتنفيذ التسجيل، حدد خيوط البلاتين كأقطاب تسجيل. تناول الطعام وخلق خطاف صغير في نهاية جدا. بعد ذلك، قم بإرفاق القطب بـ ميكرومانيبولاتور.
في الحمام، ضع قطب كهربائي مرجعي بجوار الأنسجة تحت الجلد. تقسيم دورا العمود الفقري وبيا ماطر والحصول على العصب الوركي. تحت مجهر ستيريو في 25٪ التكبير، والتقاط كراسة غرامة وتعليق النهاية التقريبية لمحور عصبي على هوك من القطب تسجيل.
تحديد المجال تقبلا من واحد, الألياف ج غير الحساسية باستخدام simulis الميكانيكية والتحفيز الحراري. إذا كان إطلاق الألياف العصبية يستجيب للمحفزات الميكانيكية والماء الساخن ، فاعتبره ألياف بوليموتو ، غير الحساسية. بعد ذلك، أدخل اثنين من أقطاب التحفيز إبرة مع فاصل ملليمترين في الجلد من حقل تحديد لتسليم المحفزات الكهربائية.
عرض شكل موجة من احتمال العمل على منظار، وتوظيف الكمبيوتر d-متن مع إشارة معدل أخذ العينات من 20 كيلوهيرتز. ثم، تسجيل المسامير باستخدام برنامج الحصول على البيانات وتحليلها في وقت لاحق مع البرامج المهنية. لقياس فشل التوصيل، وتقديم المحفزات القطب المتكررة في ترددات مختلفة إلى الألياف ج لمدة 60 ثانية.
السماح فاصل زمني 10 دقيقة للألياف للاسترخاء بين المحفزات. ثم، حساب نسبة عدد من الإخفاقات إلى عدد من نبضات التحفيز المتكررة تسليم وضرب بنسبة 100٪ للحصول على درجة فشل توصيل. لفضح العقدة جذر الظهرية، وقطع أولا فتح الجلد من خط الوسط من الظهر في الجزء l4 إلى l5.
بعد ذلك، إزالة العمود الفقري العضلات عملية البور الفقري وعملية عرضية باستخدام rongeur العظام، وفضح الجسم NDRG الحبل الشوكي. غط الحبل الشوكي المكشوف، NDRG، مع القطن المنقوع مع محلول Ringer العادي خارج الخلية للحفاظ على النشاط العصبي. وقف النزيف وإزالة الدم حسب الضرورة.
في وقت لاحق، وذلك باستخدام مقص العيون، وإزالة L4 إلى s1 هيكل العظام فوق القوفير الفقري من أجل فضح DRG والعصب الشوكي المتصلة. جعل قطع على الجلد لفضح العصب الوركي في الفخذ الأوسط. فصل وفصل العصب الوركي عن نهاية العصب البعيدة حيث يذهب داخل العضلات.
و غيت الجذع العصبي مع خط الجراحية في نهاية العصب قبل قطع. ثم، فصل العصب الوركي من النسيج الضام الكامنة عن طريق رفع نقطة ربط الأعصاب. إزالة ل dura من الحبل الشوكي، وفصل DRG من النسيج الضام الكامنة حتى تصل إلى الجزء المجاور من العصب الوركي.
وهكذا، عزل إعداد كامل من DRG مع العصب الوركي المرفقة. لمسح سطح DRG، عند التكبير 4x، قم بإزالة الدورة الشوكية بعناية على سطح L4 إلى 16 DRG باستخدام الملاقط. ضع DRG مع العصب الوركي المرفق في أنبوب زجاجي يحتوي على ملليلتر واحد من الإنزيمات المختلطة.
اجسه في حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. بعد 15 دقيقة، ارفع نهاية الخط الجراحي واحرك الإعداد إلى طبق مليء بمحلول Ringer العادي خارج الخلية لغسل الإنزيم. ثم، نقل DRG هضم إلى وعاء مملوءة حل Ringer المُكسجين خارج الخلية للتسجيل.
لتنفيذ التسجيل، وإعداد حل داخل الخلايا، وتخزينها في درجة الصفر مئوية حتى الاستخدام. باستخدام مرساة شريحة، وتحقيق الاستقرار في ganglia وربط نهاية العصب إلى قطب تحفيز الشفط. في التكبير 40x، تصور وحدد الخلايا العصبية DRG مع هدف emersion المياه.
أضعاف القطب وملء مع حل داخل الخلايا. نعلق القطب على حامل، وتطبيق الضغط الإيجابي في pipet مع مقاومة النهائي من أربعة إلى سبعة ميغاهات. بعد ذلك، جلب القطب إلى سطح الخلية.
ثم، وتطبيق الضغط السلبي على pipet لتشكيل ختم. بمجرد الوصول إلى ختم gigaohm ، قم بتعيين إمكانات الغشاء عند حوالي 60 ملليفولت وإنشاء وضع تسجيل الخلية بالكامل. في وقت لاحق، وتقديم المحفزات المتكررة من 5 إلى 50 هيرتز إلى العصب الوركي من خلال القطب الشفط لفحص فشل التوصيل.
قياس سعة AHP من خط الأساس إلى الذروة ومدة AHP 80٪. هذا الرقم يظهر التسجيلات الأصلية المتتالية من c5 واحد إعادة اطلاق النار من الفئران ردا على 10 هرتز التحفيز الكهربائي. يتم عرض كل اكتساح العشرين وعرضها من أعلى إلى أسفل.
يُظهر الإدراج إمكانية إجراء تمثيلي. وهنا تسجيلات واحدة ج ألياف من CFA حقن الفئران ردا على نفس التحفيز كما اللوحة السابقة. هذا الرقم يظهر التسجيلات المستمرة من سلسلة ردود اطلاق النار على خمسة هرتز التحفيز تحت ظروف التحكم، أو إدارة تركيز مختلف من ZD7288 في الخلايا العصبية DRG قطرها صغيرة من الفئران CFA تصنيف.
تظهر insets تتبعات موسعة للفترات التسجيل المحدد. تمثل البقع الداكنة حالات فشل الارتفاع. وأظهرت AHP منحدر أكبر ارتفاع في السيطرة.
في حين لوحظ منحدر صاعد أصغر بعد 125 micromolars في ZD7288 التطبيق. عندما تسجيل واحد fiver الوقت ، وأعتقد أنه من المهم لقطع الألياف والحفاظ على الحيوانات هو جيد أي شرط السلامة. و البيئة الدقيقة حول النيوترون
مزيج من تسجيل الألياف واحد وتطبيق DRG سليمة تعلق مع العصب الوركي، وتحسين فهمنا للجهاز العصبي المحيطي المتعلقة بالألم.
