يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التغذية نحل العسل، حول العلاقة بين سوء التغذية ونمو الغدة البلعومية والتنمية. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هو أن يمكن للمرء استخدامه لطخة بسهولة, تصور, وقياس الغدد البلعوم النحل. عموما, سوف الأفراد جديدة لهذه الطريقة النضال لأن الغدد البلعومية يمكن أن يكون من الصعب تحديد موقع وتشريح دون توجيه البصرية.
قبل البدء في الإجراء، صب ذاب الشمع الإعداد بارد في طبق بيتري الزجاج. إضافة 20 ميكرولتررس من وصمة عار Giemsa الطازجة في بئر واحد، و 50 إلى 100 ميكرولترات من المالحة في بئر مجاورة من شريحة مجهر واحد، لكل عامل ممرضة النحل أن تتم معالجتها. عندما تم تعيين الشمع، واستخدام 10 ملليمتر مقص الربيع الصغير لإزالة الرأس من النحلة الأولى واستخدام ملقط، والمجهر تشريح، وقلم نحت الشمع لتضمين الرأس الجبهة الجانب المتابعة في لوحة تشريح الشمع.
إدراج دبابيس في العينين والفم لتأمين الرأس إلى لوحة، واستخدام شفرة حلاقة حادة قابلة للكسر ثابتة في فيس دبوس لجعل شق 2-3 ملليمتر بين العينين وdddibles على كل جانب من لوحة الوجه. تشغيل بلطف مقص صغير تحت لوحة الوجه وقطع العصب الهوائي الذي يمتد بين الهوائي والدماغ. باستخدام ملقط غرامة، والاستيلاء على لوحة الوجه من الفم، ودبوس الأنسجة الوجه جنبا إلى أسفل إلى الشمع مع ملقط نقطة غرامة ودبوس.
المقبل ، ماصة 20 ميكروليت من برنامج تلفزيوني على الجزء المفتوح من الرأس. الغدد البلعوم تبدو وكأنها سلسلة من اللؤلؤ وتقع على قمة الدماغ إذا سليمة. باستخدام ملقط نقطة فائقة غرامة، حصاد بلطف واحدة من الغدد للغمر الفوري في وصمة Giemsa على الشريحة المجهرية.
بعد فترة حضانة لمدة خمس دقائق ، قم بنقل الغدة إلى بركة الملح على نفس الشريحة ، وقطع الغدة إلى قطع أصغر تحت المجهر مع المقص الصغير عند الضرورة. لقياس الغدد، افتح برنامج القياس للمجهر الخفيف، وحدد التكبير 10 مرات. ضع الشريحة على مرحلة المجهر وحدد الغدد يدويًا من خلال قطعة العين.
زيادة التكبير إلى 60 إلى 80 مرة وضبط التركيز يدويا من الغدد في التكبير الجديد. مزيد من ضبط التركيز من الغدد على الصورة الحية على الشاشة وأدخل اسم الصورة ووصف العينة في مربع اسم الصورة. انقر فوق الحصول على صورة للحصول على صورة للغدد وتحت علامة التبويب تحليل، حدد أداة المنطقة وفك تحديد قيمة ضمن علامات التبويب عرض.
الوحدة سيتم أيضاً إلغاء تحديد. تعيين كافة الإعدادات الأخرى إلى الافتراضي. لقياس acini، انقر باستمرار أو اضغط باستمرار على زر الماوس الأيسر مع تتبع محيط واحد acinus في وقت واحد بعناية قدر الإمكان.
بمجرد أن يتم قياس كل acini من صورة واحدة حدد إنشاء تقرير، مؤكداً أن الخيارات المناسبة محددة، وانقر فوق تصدير. ثم احفظ التقرير في شكل مناسب وتنظيف منطقة العمل والمواد حسب الاقتضاء. من الصعب العثور على تباين سليم و حواف محددة من acini في الأنسجة غير المطّهية.
في الغدد البلعوم الملطّخة، حواف acini حادة بسبب التباين المحسن بين الأنسجة الملوّخة والخلفية البيضاء. تنمو الغدد البلعوم مع مرور الوقت في النحل التي تتغذى العسل مختلطة مع حبوب اللقاح، مقارنة النحل التي تتغذى العسل وحدها. حجم الغدة البلعومية حساس أيضا لنوع حبوب اللقاح المقدمة.
على سبيل المثال، النحل تغذية الصحراء أو حبوب اللقاح اللوز تثبت الغدد من حجم مماثل، في حين أن النحل تغذية الوجبات الغذائية حبوب اللقاح الجنوبية الشرقية تظهر الغدد التي هي أكبر من العسل وحده تغذية النحل، ولكن أصغر من الغدد من النحل تغذية إما اللوز أو الصحراء حبوب اللقاح. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن تتذكر أن تُتشَرّخ الغدد بعناية وألا تُكَلَم أو تحت وصمتها. لا تنس أن العمل مع وصمة Giemsa يمكن أن تكون خطرة وأن الاحتياطات، مثل الحفاظ على وصمة عار بعيدا عن النيران، وذلك باستخدام التخلص السليم، وارتداء القفازات وحماية العين ينبغي دائما أن تتخذ أثناء تنفيذ هذا الإجراء.
