ونحن ممتنون كارين وينتيرهالتير و Semmler كرستين للمساعدة التقنية. وأيد هذا العمل مجموعة التميز برينلينكس-برينتولس (EXC 1086) مؤسسة البحوث الألمانية.

وقد وافقت كافة الأساليب التي تنطوي على الحيوانات التي تعيش فرايبورغ Regierungspräsidium وفقا "القانون الألماني لرعاية الحيوان".
1-الأعمال التحضيرية
<ol><li>تصميم وبناء أداة مناسبة إدراج عابر يحمل المسبار السليكون والموصل الكهربائي أثناء عملية زرع. انظر الشكل 1 لأداة إدراج مبنية مخصصة مثال.</li>
	<li>عناية تحرير الموصل المسبار والقطب السليكون من التعبئة والتغليف باستخدام الملقط مقلوب السيراميك.</li>
	<li>رفع المجلس موصل وإصلاحه بشكل أمن مع المشبك تمساح يعلق على موقف.</li>
	<li>استخدام ستيريوسكوبي، محاذاة التحقيق مع أداة الإدراج مع الملقط مقلوب السيراميك. تطبيق طبقة ~ 2 مم من شمع البارافين ذاب مع كوتيريزير الغراء المسبار إلى أداة الإدراج. الحرص على عدم لمس شانكس التحقيق أثناء هذا الإجراء.</li>
	<li>إصلاح للموصل الكهربائي برمح الأداة الإدراج باستخدام شريط لاصق القياسية. علما أنه حسب الشركة المصنعة، قد يلزم الأسلاك الأرضية يكون ملحوم إلى مجلس الموصل الكهربائي قبل غرس. إزالة العزل من قطعتين قصيرة من الأسلاك النحاسية المعزولة الورنيش باستخدام القصدير اللحام تطبيقها لحام حديد (400 درجة مئوية). لحام الأسلاك الأرضية بفتحات المناسبة في مجلس الموصل الكهربائي.</li>
	<li>إزالة عزل قطعتين إضافية من الأسلاك النحاسية. التفاف كل الأسلاك النحاسية العارية ثلاث مرات حول المسمار فولاذ المقاوم للصدأ (قطرها 1 مم، وطول 2 ملم). تطبيق التمويه مناسبة للحام الصلب ولحام الأسلاك النحاسية إلى الجزء السفلي من غطاء المسمار. تأكد من أن الجزء السفلي نصف رفات المسمار الخيط مجاناً للحام القصدير.</li>
	<li>استخدام متعدد قياسية للتحقق من وجود تماس كهربائي بين السلك والمسمار.</li>
	<li>تطهير شانكس المسبار السليكون ومسامير الأرض بالانغماس في الإيثانول 70% (10 ق).</li>
	<li>إعداد غطاء حماية لزرع المسبار بقطع رأس البلاستيك ماصة باستور في نصف.</li>
</ol>2. جراحة زرع
<ol><li>تعقيم الأدوات الجراحية (مقص، ملقط الجميلة ذات الرؤوس، والمشابك الجراحية) مع معقم حبة ساخنة. مسح جميع الأسطح مع الإيثانول 70%.</li>
	<li>حمل التخدير مع إيسوفلوراني 3% في الأوكسجين وألقى في ~ 1 لتر في الدقيقة.<ol>
<li>للصيانة، واستخدام إيسوفلوراني 1-1، 5%. علما بأن تركيز isoflurane المطلوبة لتحقيق التسامح الجراحية يمكن أن تختلف من الحيوان للحيوان.</li>
		<li>ويتحقق التسامح الجراحية مستقرة عند الحيوان لا تستجيب معسر أخمص القدمين. رصد معدل التنفس للماوس وضبط تركيز isoflurane إذا لزم الأمر.</li>
		<li>تطبيق مرهم عيون الحيوان لمنع الجفاف.</li>
	</ol>
</li>
	<li>جبل الماوس في إطار ستيريوتاكسيك بإدراج أشرطة الإذن بلطف في قناة الإذن. مرة واحدة واستقرت رأس الماوس بأشرطة الإذن، ضع قطعة فم على الآنف لتسليم isoflurane المستمر. ضع الماوس على وسادة أو منشفة على وسادة تدفئة وحقن البوبرينورفين تحت الجلد (0.05-0.1 مغ/كغ وزن الجسم) لضمان التسكين بعد العملية الجراحية.</li>
	<li>حلق الرأس مع آلة حلاقة قياسية وتطهير الجلد مع الإيثانول 70%. باستخدام مقص جراحي، جعل شق في الجلد على طول خط الوسط من الجمجمة وفتح الجلد باستخدام المشابك الجراحية.</li>
	<li>قم بمحاذاة رأس الحيوان مع المعونة من أداة المحاذاة ستيريوتاكسيك بريجما المستوى وامدا. وينبغي أن يكون هناك أقل من 50 ميكرون من إزاحة الارتفاع بين بريجما وامدا. وعلاوة على ذلك، تحديد مستوى سطح الرأس على طول المحور ميديولاتيرال بقياس العمق من بريجما في الجمجمة في المسافات والأيسر (مثلاً، 1 مم غادر وحق بريجما). ضبط إمالة الرأس إذا لزم الأمر.</li>
	<li>تنظيف الرأس مع بيروكسيد الهيدروجين 3% والقضاء على الجفاف مع مناديل معقمة القطن.</li>
	<li>تحديد موقع اوديما بالنسبة إلى بريجما باستخدام طائرة مناسبة أطلس ستيريوتاكسيك12.</li>
	<li>استخدام رأس حفر 0.9 ملم، حفر ثقوب المسمار اثنين في العظام خلال المخيخ مكان مسامير الأرض ومرجع. بالإضافة إلى ذلك، 1-3 ثقوب للمسامير ترسيخ مرغوب فيه لتحقيق الاستقرار في عملية الزرع. موقع مسامير الربط سيعتمد على موقع اوديما. لغرس في الحصين، مكان مسامير ربط أكثر contralateral الجدارية وعن القشرة الأمامية. إدخال المسامير في العظام باستخدام مفك براغي مناسبة. الحرص على عدم اختراق الدماغ.</li>
	<li>أداء اوديما ببطء رقيق الجمجمة بالحفر في منطقة مستطيلة حول الجانب غرس. وكثيراً ما ترطيب العظام مع الفوسفات تعقيم المخزن المؤقت (الجريدة الرسمية). يمكن اخترقت الجمجمة ضعفت المتبقية بلطف وإزالتها مع المعونة من إبرة حقن (27 ز) غرامة وزوج من ملاقط.</li>
	<li>بيرس بعناية الأم الجافية بإبرة حقن (27 ز) رقيقة. شكل هوك صغيرة عن طريق ثني طرف الإبرة مع زوج من ملاقط وسحب دوراً للإزالة. تطبيق الجريدة الرسمية لمنع جفاف سطح الدماغ.</li>
	<li>تحميل الأداة الإدراج القطب على حامل ستيريوتاكسيك وصفر التحقيق في بريجما وحرك اوديما التحقيق إلى إحداثيات ستيريوتاكسيك. اختراق سطح الدماغ ببطء. تأكد من عدم ثني مهاوي التحقيق. تجنب زرع عن طريق الأوعية الدموية.</li>
	<li>انخفاض ببطء التحقيق حتى ~ 200 ميكرومتر أعلاه العمق المطلوب. تغطية اوديما والسيقان المسبار السيليكون مع فازلين معقم للحماية. تطبيق الأسمنت الأسنان لإصلاح القاعدة للتحقيق معه لترسيخ المسمار في الجمجمة.</li>
	<li>الحق بعد تطبيق الأسمنت، تتحرك ببطء التحقيق بعمق الهدف. تتقدم ميكرومتر آخر 200 ~ بعد تطبيق الأسمنت يقلل من الحركة الجانبية للتحقيق ويضمن تلف الأنسجة الحد الأدنى في المنطقة المستهدفة. علما بأن فترة علاج من الأسمنت المستخدمة يمكن أن تؤثر على هذه الخطوة من البروتوكول. بسرعة علاج الأسمنت، تجاهل هذه الخطوة وزرع مباشرة التحقيق بعمق الهدف تجنبا للأضرار بالتحقيق السليكون.</li>
	<li>بعد وقد شُفي الأسمنت، الإفراج عن التحقيق من أداة الإدراج قبل ذوبان الشمع مع كوتيريزير.</li>
	<li>إطلاق المجلس موصل من الجهاز الإدراج ووضعه في مكان مناسب في الجمجمة باستخدام المشبك التماسيح إرفاق إلى مؤشر الإدراج. في حالة زرع التحقيق إلى الحصين، وضع المجلس موصل على العظم الجداري كونترالاتيرال. إصلاح المجلس موصل الجمجمة باستخدام الأسمنت الأسنان.</li>
	<li>لحام أسلاك أرضية ومرجعية المجلس موصل بأسلاك تعلق على مسامير اثنين على المخيخ.</li>
	<li>تقليم الغطاء الواقي للطول الصحيح ووضعه على التحقيق السليكون. إصلاح الغطاء إلى المجلس موصل والجمجمة باستخدام أسمنت الأسنان، تجنب الجلد حول الجمجمة المكشوفة. خياطة الجلد حول الموقع غرس عادة غير مطلوب.</li>
</ol>3-الإنعاش بعد الجراحة
<ol><li>تطبيق العلاج مسكن مناسب لمدة يومين على الأقل (مثلاً تحت الجلد حقن البوبرينورفين كل ح 6 خلال النهار وفي مياه الشرب بين عشية وضحاها جنبا إلى جنب مع والايبوبروفين (4-5 ملغ/كغ من وزن الجسم) تحت الجلد كل 24 ساعة). واحد-الإسكان يوصي بمنع الأضرار بعملية الزرع.</li>
	<li>السماح بأسبوع واحد على الأقل للتعافي. التشاور مع المبادئ التوجيهية لرعاية الحيوانات المحلية.</li>
</ol>4. الحصول على البيانات
<ol><li>سجل لفبس من الانتقال بحرية الفئران باستخدام نظام حيازة بيانات مناسبة متصلة عن طريق مبدلة. للحصول على لفبس، استخدام تردد أخذ عينات من 1-5 كيلو هرتز. معدلات أخذ العينات (20-30 كيلو هرتز) مطلوبة إذا التصريفات وحدة واحدة أن يسجل جنبا إلى جنب مع طابعات الحجم الكبير.</li>
	<li>تخزين الملفات الخام تسجيل القنوات الفردية للتحليل دون اتصال.</li>
</ol>5-علم الأنسجة
<ol><li>بعد انتهاء التسجيل، عميق تخدير الحيوان (مثل 2 غ/كغ الجسم الوزن يوريتان حقن إينترابيريتونيلي). وتؤكد الدولة مخدر بعدم الرد على أخمص القدمين معسر.</li>
	<li>نتخلل ترانسكارديالي الماوس مع المثلج مخزنة الفوسفات المالحة (~ 1 دقيقة) تليها بارافورمالدهيد 4% (~ 10 دقيقة) باستخدام أساليب نضح إينتراكارديال القياسية13. قبل التروية، ليسيونينج كهربائياً من مواقع التسجيل قد التي يؤديها (مثلاً عن طريق تطبيق الخامس 10-20 من الجهد المستمر ليصل إلى 1 s). بدلاً من ذلك، تطبيق الأصباغ الفلورية نصائح عرقوب قبل غرس يمكن استخدامها لتحديد المسار. ويوصي باختبار الأساليب المختلفة للتعرف على مواقف قطب كهربائي للحصول على أفضل النتائج مع أنواع مختلفة من المجسات السليكون.</li>
	<li>قص أجزاء الدماغ (~ 100 ميكرومتر) ووصمة عار الشرائح مع 4-6-دياميدينو-2-فينيليندولي (DAPI، 1 ميكروغرام/مل) تليها ثلاث خطوات الغسيل في الجريدة الرسمية (كل 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة).</li>
	<li>وضع المقاطع على شريحة مجهر وتطبيق قطره من تضمين المتوسطة ويشمل القسم كشف الغطاء. واسمحوا التضمين متوسطة الجافة بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة.</li>
	<li>استخدام ابيفلوريسسينسي أو [كنفوكل] مجهر مسح ليزر، تحديد مواقع التسجيل.</li>
	<li>لمحاولة استرداد المسبار السيليكون لاستخدامها مرة أخرى، إجراء التحقيق مع المشبك التماسيح والإفراج عن التحقيق من سكل بعناية ذوبان الأسمنت الأسنان لحام حديد (400 درجة مئوية). الحرص على عدم لمس شانكس التحقيق أثناء هذا الإجراء!</li>
	<li>أغسل المسبار في الماء المقطر الساخن (~ 80 درجة مئوية، 15 دقيقة) تليها حل الانزيمية (1% تيرجازيمي في الماء المقطر، 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة) والغسيل آخر خطوة في الماء المقطر (15 دقيقة). علما أن معدل نجاح الانتعاش مسبار منخفضة.</li>
</ol>6-لجنة التنمية المستدامة التحليل
<ol><li>استخدام بيئة تحليل مناسبة (مثل بيثون)، تحويل بيانات طابعات الحجم الكبير شأنك الفردية إلى لجنة التنمية المستدامة التي تقارب المشتقة الثانية المكانية على طول الساق <img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/57714/57714eq1.jpg"> حيث طابعات الحجم الكبيرn, t هو إشارة طابعات الحجم الكبير على مسرىth nعند الزمن t و Δz هو التباعد بين القطب. لاحظ أن سبب n-1 وعمليات n+ 1، يتعذر تقدير لجنة التنمية المستدامة أقطاب الأول والأخير عرقوب، التي يجب أن تؤخذ قيد النظر أثناء موضع التحقيق. تنفيذ الصيغة تقريب استخدام قطعة قصيرة من التعليمات البرمجية التي يحسب إشارة لجنة التنمية المستدامة لكل قطب كهربائي أثناء التكرار مع مرور الزمن (انظر ملف التعليمات البرمجية الإضافية).</li>
	<li>استخدام إشارة لجنة التنمية المستدامة التي تم الحصول عليها لمزيد من التحليل (مثلاً، دراسة نطاقات الترددات المحددة من ذبذبات الدماغ عن طريق تطبيق عوامل تصفية تمرير النطاق).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buzs&#225;ki, G., Draguhn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+oscillations+in+cortical+networks.">Neuronal oscillations in cortical networks.</a> Science. 304 (5679), 1926-1929 (2004).</li><li>Keefe, J., Recce, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+relationship+between+hippocampal+place+units+and+the+EEG+theta+rhythm.">Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm.</a> Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).</li><li>Benchenane, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coherent+theta+oscillations+and+reorganization+of+spike+timing+in+the+hippocampal-prefrontal+network+upon+learning.">Coherent theta oscillations and reorganization of spike timing in the hippocampal-prefrontal network upon learning.</a> Neuron. 66 (6), 921-936 (2010).</li><li>Jadhav, S. P., Kemere, C., German, P. W., Frank, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Awake+hippocampal+sharp-wave+ripples+support+spatial+memory.">Awake hippocampal sharp-wave ripples support spatial memory.</a> Science. 336 (6087), 1454-1458 (2012).</li><li>Yamamoto, J., Suh, J., Takeuchi, D., Tonegawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+execution+of+working+memory+linked+to+synchronized+high-frequency+gamma+oscillations.">Successful execution of working memory linked to synchronized high-frequency gamma oscillations.</a> Cell. 157 (4), 845-857 (2014).</li><li>Karalis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4-Hz+oscillations+synchronize+prefrontal-amygdala+circuits+during+fear+behavior.">4-Hz oscillations synchronize prefrontal-amygdala circuits during fear behavior.</a> Nature Neuroscience. 19 (4), 605-612 (2016).</li><li>Khodagholy, D., Gelinas, J. N., Buzs&#225;ki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning-enhanced+coupling+between+ripple+oscillations+in+association+cortices+and+hippocampus.">Learning-enhanced coupling between ripple oscillations in association cortices and hippocampus.</a> Science. 358 (6361), 369-372 (2017).</li><li>Buzs&#225;ki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+extracellular+fields+and+currents--EEG,+ECoG,+LFP+and+spikes.">The origin of extracellular fields and currents--EEG, ECoG, LFP and spikes.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (6), 407-420 (2012).</li><li>Mitzdorf, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+source-density+method+and+application+in+cat+cerebral+cortex:+investigation+of+evoked+potentials+and+EEG+phenomena.">Current source-density method and application in cat cerebral cortex: investigation of evoked potentials and EEG phenomena.</a> Physiological Reviews. 65 (1), 37-100 (1985).</li><li>Laszt&#243;czi, B., Klausberger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Layer-specific+GABAergic+control+of+distinct+gamma+oscillations+in+the+CA1+hippocampus.">Layer-specific GABAergic control of distinct gamma oscillations in the CA1 hippocampus.</a> Neuron. 81 (5), 1126-1139 (2014).</li><li>Str&#252;ber, M., Sauer, J. -. F., Jonas, P., Bartos, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distance-dependent+inhibition+facilitates+focality+of+gamma+oscillations+in+the+dentate+gyrus.">Distance-dependent inhibition facilitates focality of gamma oscillations in the dentate gyrus.</a> Nature Communications. 8 (1), 758 (2017).</li><li>Franklin, K. B. J., Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2007).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Kajikawa, Y., Schroeder, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+local+is+the+local+field+potential?.">How local is the local field potential?.</a> Neuron. 72 (5), 847-858 (2011).</li><li>Berens, P., Keliris, G. A., Ecker, A. S., Logothetis, N. K., Tolias, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feature+selectivity+of+the+gamma-band+of+the+local+field+potential+in+primate+primary+visual+cortex.">Feature selectivity of the gamma-band of the local field potential in primate primary visual cortex.</a> Frontiers in Neuroscience. 2 (2), 199-207 (2008).</li><li>Last&#243;czi, B., Klausberger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+gamma+oscillations+in+the+distal+dendritic+field+of+the+dentate+gyrus+and+the+CA1+area+of+mouse+hippocampus.">Distinct gamma oscillations in the distal dendritic field of the dentate gyrus and the CA1 area of mouse hippocampus.</a> Brain Structure and Function. 222 (7), 3355-3365 (2017).</li><li>Nguyen Chi, V., M&#252;ller, C., Wolfenstetter, T., Yanovsky, Y., Draguhn, A., Tort, A. B. L., Branka&#269;k, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+respiration-driven+rhythm+distinct+from+theta+oscillations+in+awake+mice.">Hippocampal respiration-driven rhythm distinct from theta oscillations in awake mice.</a> Journal of Neuroscience. 36 (1), 162-177 (2016).</li><li>Chung, J., Sharif, F., Jung, D., Kim, S., Royer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-drive+and+headgear+for+chronic+implant+and+recovery+of+optoelectronic+probes.">Micro-drive and headgear for chronic implant and recovery of optoelectronic probes.</a> Scientific Reports. 7 (1), 2773 (2017).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

أدلة متزايدة تشير إلى أن ذبذبات الدماغ في الدوائر العصبية هيبوكامبال تحدث في النطاقات المكانية المنفصلة10،،من1116. تحليل لجنة التنمية المستدامة يخفض بشكل كبير تأثير حجم التوصيل، شرطا حاسما لدراسة الأحداث المحلية التذبذب. مع هذا الفيديو، ?...

التذبذبات في طابعات الحجم الكبير خطيرة تشترك في معلومات معالجة بواسطة الدوائر العصبية. وهي تغطي طائفة واسعة من الترددات، تتراوح بين موجات بطيئة (~ 1 هرتز) تموج بسرعة ذبذبات (~ 200 هرتز)1. نطاقات التردد متميزة ترتبط بالوظائف المعرفية بما في ذلك الذاكرة والمعالجة العاطفية، والملاحة2،3،،من45،،من67. تدفق التيار عبر أغشية الخلايا العصبية تشكل الجزء الأكبر من إشارة طابعات الحجم الكبير8. الكاتيونات دخول الخلية (مثلاً عن طريق تنشيط نهايات ضادات جلوتاماتيرجيك) تمثل المصارف الحالية نشطة (كما يترك تهمة المتوسطة خارج الخلية). وفي المقابل، يصور التدفق الصافي مقابل إيجابية إلى الوسط خارج الخلية، على سبيل المثال بالتنشيط من الاشتباكات العصبية المثبطة جابايرجيك، مصدر الحالية نشطة في هذا الموقع. في قطبانيه العصبية، المقترنة المصارف الحالية مع مصادر سلبية، والعكس بالعكس بسبب تعويض التيارات التي تؤثر على الغشاء المسؤول في مواقع بعيدة.
يمكن أن يؤدي أيضا إلى الجهد الكبير أو في قطب تسجيل مجال الكهربائية التي تنتجها العمليات العصبية البعيدة وقد وبالتالي يعتبر كذبا كحدث محلي. هذا التوصيل الحجم يشكل تحديا خطيرا لتفسير الإشارات طابعات الحجم الكبير. تحليل لجنة التنمية المستدامة يوفر معلومات حول المصارف الحالية المحلية والمصادر الأساسية لطابعات الحجم الكبير إشارات، ويشمل ذلك وسيلة الحد من تأثير حجم التوصيل8. في هياكل مغلفة مثل قرن آمون، ويمكن الحصول أحادي البعد لجنة التنمية المستدامة إشارات المشتقة المكانية الثانية من طابعات الحجم الكبير سجل من مسافة واحدة أقطاب ترتيب عمودي إلى طائرات الصفحي9. أتاح ظهور المسابير السليكون الخطية المتاحة تجارياً الباحثين استخدام أسلوب لجنة التنمية المستدامة لدراسة النشاط المحلي التذبذب في قرن آمون. على سبيل المثال، وقد ثبت أن ذبذبات غاما متميزة تبرز بصورة خاصة بطبقة في المنطقة CA110. علاوة على ذلك، حددت لجنة التنمية المستدامة تحليل المستقلة بؤر النشاط غاما في الطبقة الرئيسية الخلية المغزلي المسنن11. الأهم من ذلك، كانت هذه النتائج الظاهر في لجنة التنمية المستدامة المحلية ولكن ليس في طابعات الحجم الكبير إشارات فقط. وهكذا يوفر تحليل لجنة التنمية المستدامة أداة قوية لاكتساب المعرفة في عمليات سليكون الحصين.
في هذا البروتوكول، ونحن توفير دليل شامل للحصول على إشارات لجنة التنمية المستدامة أحادي الأبعاد مع تحقيقات السليكون. هذه الأساليب سوف تمكن المستخدمين من التحقيق في أحداث التذبذب المترجمة في قرن آمون الفئران يتصرف.

<table><tbody><tr><td>Crocodile clamp with stand</td><td>Reichelt Elektronik</td><td>HALTER ZD-10D</td><td></td></tr><tr><td>Silicon probe</td><td>Cambridge Neurotech</td><td>P-series 32</td><td></td></tr><tr><td>Stereoscope</td><td>Olympus</td><td>SZ51</td><td></td></tr><tr><td>Varnish-insulated copper wire</td><td>B&amp;uuml;rklin Elektronik</td><td>89 F 232</td><td></td></tr><tr><td>Ground screws</td><td>Screws &amp;amp; More GmbH (screwsandmore.de)</td><td>DIN 84 A2 M1x2</td><td></td></tr><tr><td>Flux</td><td>Stannol</td><td>114018</td><td></td></tr><tr><td>Ceramic-tipped forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11210-60</td><td></td></tr><tr><td>Paraffine Wax</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>327204</td><td></td></tr><tr><td>Cauterizer</td><td>Fine Science Tools</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Soldering iron</td><td>Kurtz Ersa</td><td>OIC1300</td><td></td></tr><tr><td>Multimeter</td><td>Uni-T</td><td>UT61C</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Carl Roth</td><td>9065.1</td><td></td></tr><tr><td>Pasteur pipettes</td><td>Carl Roth</td><td>EA65.1</td><td></td></tr><tr><td>Heat sterilizer</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic frame</td><td>David Kopf</td><td>Model 1900</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic electrode holder</td><td>David Kopf</td><td>Model 1900</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbvie</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Oxygen concentrator</td><td>Respironix</td><td>1020007</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Indivior UK Limited</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Electrical shaver</td><td>Tondeo</td><td>Eco-XS</td><td></td></tr><tr><td>Heating pad</td><td>Thermolux</td><td>463265/-67</td><td></td></tr><tr><td>Surgical clamps</td><td>Fine Science Tools</td><td>18050-28</td><td></td></tr><tr><td>Hydrogen peroxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>Sterile cotton wipes</td><td>Carl Roth</td><td>EH12.1</td><td></td></tr><tr><td>Drill</td><td>Proxxon</td><td>Micromot 230/E</td><td></td></tr><tr><td>21G injection needle</td><td>B. Braun</td><td>4657527</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffer/phosphate buffered saline</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic atlas</td><td>Elsevier</td><td>9.78012E+12</td><td></td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>Surgical forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11272-40</td><td></td></tr><tr><td>27G injection needles</td><td>B. Braun</td><td>4657705</td><td></td></tr><tr><td>Vaseline</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dental cement</td><td>Sun Medical</td><td>SuperBond T&amp;amp;M</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis</td><td>Rimadyl 50mg/ml</td><td></td></tr><tr><td>Recording amplifier</td><td>Intan Technologies</td><td>C3323</td><td></td></tr><tr><td>USB acquisition board</td><td>Intan Technologies</td><td>C3004</td><td></td></tr><tr><td>Recording cables</td><td>Intan Technologies</td><td>C3216</td><td></td></tr><tr><td>Electrical commutator</td><td>Doric lenses</td><td>HRJ-OE_FC_12_HARW</td><td></td></tr><tr><td>Acquisition software</td><td>OpenEphys (www.open-ephys.org)</td><td>GUI</td><td>allows platform-independent data acquisition</td></tr><tr><td>Computer for data acquisition</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Analysis environment</td><td>Python (www.python.org)</td><td></td><td>allows platform-independent data analysis</td></tr><tr><td>Urethane</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vibratome</td><td>Leica</td><td>VT1000</td><td></td></tr><tr><td>Microscope slides</td><td>Carl Roth</td><td>H868.1</td><td></td></tr><tr><td>Cover slips</td><td>Carl Roth</td><td>H878.2</td><td></td></tr><tr><td>Embedding medium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>81381-50G</td><td></td></tr><tr><td>Distilled water</td><td>Millipore</td><td>Milli Q</td><td>Table-top machine for the production of distilled water</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Alconox</td><td>Tergazyme</td><td></td></tr></tbody></table>

recording spatially restricted oscillations in the hippocampus of behaving mice

الإمكانات الميدانية المحلية (طابعات الحجم الكبير) ينبثق من حركات أيون عبر الأغشية العصبية. نظراً للجهد سجلتها أقطاب طابعات الحجم الكبير يعكس الحقل الكهربائي summed كمية كبيرة من أنسجة المخ، استخراج معلومات حول النشاط المحلي يشكل تحديا. دراسة رقائق الخلايا العصبية، ومع ذلك، يتطلب موثوق بها تمييز بين الأحداث المحلية حقاً وإشارات أجرت وحدة التخزين التي تنشأ في المناطق البعيدة من الدماغ. تحليل كثافة (CSD) المصدر الحالي يوفر حلاً لهذه المشكلة بتوفير معلومات حول المصارف الحالية ومصادر مقربة من أقطاب كهربائية. في مناطق الدماغ مع الصفحي سيتوارتشيتيكتوري مثل قرن آمون، يمكن الحصول على أحادي البعد لجنة التنمية المستدامة بتقدير مشتقة الثانية المكانية طابعات الحجم الكبير. هنا، يمكننا وصف أسلوب لفبس مولتيلامينار سجل استخدام المسابير السليكون الخطي مزروع في الحصين الظهرية. وتحسب آثار لجنة التنمية المستدامة على طول السيقان الفردية للتحقيق. وهكذا يصف هذا البروتوكول إجراء لحل ذبذبات مكانياً مقيد شبكة الخلايا العصبية في قرن آمون التحرك بحرية الفئران.

ويبين الشكل 1 الإدراج الأداة المستخدمة لغرس المسابير السليكون. تسجيلات من السليكون مزمن مزروع يسبر استهداف منطقة CA1 وطبقة الخلايا الحبيبية المغزلي المسنن مبينة في الشكل 2. سجلنا لفبس من شانكس المسبار خلال حرية الحركة في هوميكاجي. لتقليل ت?...

Watch this Scientific Journal Video about Recording Spatially Restricted Oscillations in the Hippocampus of Behaving Mice at JoVE.com

Recording Spatially Restricted Oscillations in the Hippocampus of Behaving Mice

ويصف هذا البروتوكول تسجيل الإمكانات الميدانية المحلية مع متعدد عرقوب يسبر السليكون الخطي. يسمح تحويل الإشارات باستخدام تحليل كثافة المصدر الحالي إعادة بناء نشاط الكهربائية المحلية في قرن آمون الماوس. مع هذه التقنية، يمكن دراسة ذبذبات الدماغ مكانياً المقيدة في الانتقال بحرية الفئران.

تسجيل مكانياً مقيد التذبذبات في قرن آمون التصرف الفئران

The local field potential (LFP) emerges from ion movements across neural membranes. Since the voltage recorded by LFP electrodes reflects the summed ...

recording-spatially-restricted-oscillations-hippocampus-behaving

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

8.7K Views.  University of Freiburg. ويصف هذا البروتوكول تسجيل الإمكانات الميدانية المحلية مع متعدد عرقوب يسبر السليكون الخطي. يسمح تحويل الإشارات باستخدام تحليل كثافة المصدر الحالي إعادة بناء نشاط الكهربائية المحلية في قرن آمون الماوس. مع هذه التقنية، يمكن دراسة ذبذبات الدماغ مكانياً المقيدة ف?...

Video: Recording Spatially Restricted Oscillations in the Hippocampus of Behaving Mice

Tuning in the Hippocampal Theta Band In Vitro: Methodologies for Recording from the Isolated Rodent Septohippocampal Circuit

This protocol outlines the procedures for preparing and recording from the isolated whole hippocampus, of WT and transgenic mice, along with recent improvements in methodologies and applications for the study of theta oscillations. A simple characterization of the isolated hippocampal preparation is presented whereby the relationship between internal hippocampal theta oscillators is examined together with the activity of pyramidal cells, and GABAergic interneurons, of the cornu ammonis-1 (CA1) and subiculum (SUB) areas. Overall, we show that the isolated hippocampus is capable of generating intrinsic theta oscillations in vitro and that rhythmicity generated within the hippocampus can be precisely manipulated by optogenetic stimulation of parvalbumin-positive (PV) interneurons. The in vitro isolated hippocampal preparation offers a unique opportunity to use simultaneous field and intracellular patch-clamp recordings from visually-identified neurons to better understand the mechanisms underlying theta rhythm generation.

Tuning in the Hippocampal Theta Band In Vitro: Methodologies for Recording from the Isolated Rodent Septohippocampal Circuit

Here, we present a protocol for recording rhythmic neuronal network theta and gamma oscillations from an isolated whole hippocampal preparation. We describe the experimental steps from extraction of the hippocampus to details of field, unitary and whole-cell patch clamp recordings as well as optogenetic pacing of the theta rhythm.

ضبط في الحصين ثيتا الفرقة<em&gt; في المختبر</em&gt;: منهجيات لتسجيل من القوارض معزولة سيبوهيبوكامبال الدائرة

This protocol outlines the procedures for preparing and recording from the isolated whole hippocampus, of WT and transgenic mice, along with recent ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools to selectively manipulate brain rhythms. Here we describe an approach combining projection-specific optogenetics with extracellular electrophysiology for high-fidelity control of hippocampal theta oscillations (5-10 Hz) in behaving mice. The specificity of the optogenetic entrainment is achieved by targeting channelrhodopsin-2 (ChR2) to the GABAergic population of medial septal cells, crucially involved in the generation of hippocampal theta oscillations, and a local synchronized activation of a subset of inhibitory septal afferents in the hippocampus. The efficacy of the optogenetic rhythm control is verified by a simultaneous monitoring of the local field potential (LFP) across lamina of the CA1 area and/or of neuronal discharge. Using this readily implementable preparation we show efficacy of various optogenetic stimulation protocols for induction of theta oscillations and for the manipulation of their frequency and regularity. Finally, a combination of the theta rhythm control with projection-specific inhibition addresses the readout of particular aspects of the hippocampal synchronization by efferent regions.

We describe the use of optogenetics and electrophysiological recordings for selective manipulations of hippocampal theta oscillations (5-10 Hz) in behaving mice. The efficacy of the rhythm entrainment is monitored using local field potential. A combination of opto- and pharmacogenetic inhibition addresses the efferent readout of hippocampal synchronization.

أوبتوجينيتيك الرائعة للذبذبات ثيتا هيبوكامبال في التصرف الفئران

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...

Acute Mouse Brain Slicing to Investigate Spontaneous Hippocampal Network Activity

Acute rodent brain slicing offers a tractable experimental approach to gain insight into the organization and function of neural circuits with single-cell resolution using electrophysiology, microscopy, and pharmacology. However, a major consideration in the design of in vitro experiments is the extent to which different slice preparations recapitulate naturalistic patterns of neural activity as observed in vivo. In the intact brain, the hippocampal network generates highly synchronized population activity reflective of the behavioral state of the animal, as exemplified by the sharp-wave ripple complexes (SWRs) that occur during waking consummatory states or non-REM sleep. SWRs and other forms of network activity can emerge spontaneously in isolated hippocampal slices under appropriate conditions. In order to apply the powerful brain slice toolkit to the investigation of hippocampal network activity, it is necessary to utilize an approach that optimizes tissue health and the preservation of functional connectivity within the hippocampal network. Mice are transcardially perfused with cold sucrose-based artificial cerebrospinal fluid. Horizontal slices containing the hippocampus are cut at a thickness of 450 &#956;m to preserve synaptic connectivity. Slices recover in an interface-style chamber and are transferred to a submerged chamber for recordings. The recording chamber is designed for dual surface superfusion of artificial cerebrospinal fluid at a high flow rate to improve oxygenation of the slice. This protocol yields healthy tissue suitable for the investigation of complex and spontaneous network activity in vitro.

This protocol describes the preparation of horizontal hippocampal-entorhinal cortex (HEC) slices from mice exhibiting spontaneous sharp-wave ripple activity. Slices are incubated in a simplified interface holding chamber and recordings are performed under submerged conditions with fast-flowing artificial cerebrospinal fluid to promote tissue oxygenation and the spontaneous emergence of network-level activity.

حاد الدماغ الماوس تشريح للتحقيق عفوية نشاط شبكة فرس النهر

Acute rodent brain slicing offers a tractable experimental approach to gain insight into the organization and function of neural circuits with single-cell ...

Craniotomy Procedure for Visualizing Neuronal Activities in Hippocampus of Behaving Mice

Imaging neuronal activities at single-cell resolution in awake behaving animals is a very powerful approach for the investigation of neural circuit functions in systems neuroscience. However, high absorbance and scattering of light in mammalian tissue limit intravital imaging mostly to superficial brain regions, leaving deep-brain areas, such as the hippocampus, out of reach for optical microscopy. In this video, we show the preparation and implantation of the custom-made imaging window to enable chronic in vivo imaging of the dorsal hippocampal CA1 region in head-fixed behaving mice. The custom-made window is supplemented with an infusion cannula that allows targeted delivery of viral vectors and drugs to the imaging area. By combining this preparation with wide-field imaging, we performed a long-term recording of neuronal activity using a fluorescent calcium indicator from large subsets of neurons in behaving mice over several weeks. We also demonstrated the applicability of this preparation for voltage imaging with single-spike resolution. High-performance genetically encoded indicators of neuronal activity and scientific CMOS cameras allowed the recurrent visualization of subcellular morphological details of single neurons at high temporal resolution. We also discuss the advantages and potential limitations of the described method and its compatibility with other imaging techniques.

This article demonstrates the preparation of a custom-made imaging window supplemented with infusion cannula and its implantation onto the CA1 region of the hippocampus in mice.

إجراء استئصال القحف لتصور الأنشطة العصبية في قرن آمون من الفئران Behaving

Imaging neuronal activities at single-cell resolution in awake behaving animals is a very powerful approach for the investigation of neural circuit ...

تسجيل LFP في دماغ الفأر للبحث المعرفي وتحليل المخدرات

Dual Extracellular Recordings in the Mouse Hippocampus and Prefrontal Cortex

The technique of recording local field potentials (LFPs) is an electrophysiological method used to measure the electrical activity of localized neuronal populations. It serves as a crucial tool in cognitive research, particularly in brain regions like the hippocampus and prefrontal cortex. Dual LFP recordings between these areas are of particular interest as they allow the exploration of interregional signal communication. However, methods for performing these recordings are rarely described, and most commercial recording devices are either expensive or lack adaptability to accommodate specific experimental designs. This study presents a comprehensive protocol for performing dual-electrode LFP recordings in the mouse hippocampus and the prefrontal cortex to investigate the effects of antipsychotic drugs and potassium channel modulators on LFP properties in these areas. The technique enables the measurement of LFP properties, including power spectra within each brain region and coherence between the two. Additionally, a low-cost, custom-designed recording device has been developed for these experiments. In summary, this protocol provides a means to record signals with high signal-to-noise ratios in different brain regions, facilitating the investigation of interregional information communication within the brain.

تسليط الضوء على المؤلف: دراسة تأثيرات الأدوية على إشارات الدماغ باستخدام بروتوكول تسجيل LFP المزدوج في الفئران

This protocol outlines the use of a custom-designed recording device and electrodes to record local field potentials and investigate information flow in the mouse hippocampus and prefrontal cortex.

تسجيلات مزدوجة خارج الخلية في الحصين الفأر وقشرة الفص الجبهي

The technique of recording local field potentials (LFPs) is an electrophysiological method used to measure the electrical activity of localized neuronal ...

<meta charset="utf8"></head><body>تسجيل النشاط العصبي أثناء التنقل في عمود الرائحة باستخدام التصوير المصغر

Miniscope Recording Calcium Signals at Hippocampus of Mice Navigating an Odor Plume

Mice navigate an odor plume with a complex spatiotemporal structure in the dark to find the source of odorants. This article describes a protocol to monitor behavior and record Ca2+ transients in dorsal CA1 stratum pyramidale neurons in the hippocampus (dCA1) in mice navigating an odor plume in a 50 cm x 50 cm x 25 cm odor arena. An epifluorescence miniscope focused through a gradient-index (GRIN) lens imaged Ca2+ transients in dCA1 neurons expressing the calcium sensor GCaMP6f in Thy1-GCaMP6f mice. The paper describes the behavioral protocol to train the mice to perform this odor plume navigation task in an automated odor arena. The methods include a step-by-step procedure for the surgery for GRIN lens implantation and baseplate placement for imaging GCaMP6f in CA1. The article provides information on real-time tracking of the mouse position to automate the start of the trials and delivery of a water reward. In addition, the protocol includes information on using an interface board to synchronize metadata describing the automation of the odor navigation task and frame times for the miniscope and a digital camera tracking mouse position. Moreover, the methods delineate the pipeline used to process GCaMP6f fluorescence movies by motion correction using the NorMCorre algorithm followed by identification of regions of interest with EXTRACT. Finally, the paper describes an artificial neural network approach to decode spatial paths from CA1 neural ensemble activity to predict mouse navigation of the odor plume.

<meta charset="utf8"></head><body>أضواء الكاتب: فهم معالجة المعلومات الشمية والمكانية بواسطة الدماغ من خلال التحليل السلوكي في الوقت الفعلي

This protocol investigates the brain-behavior relationship in hippocampal CA1 in mice navigating an odor plume. We provide a step-by-step protocol, including surgery to access imaging of the hippocampus, behavioral training, miniscope GCaMP6f recording and processing of the brain, and behavioral data to decode the mouse position from ROI neural activity.

منظار صغير يسجل إشارات الكالسيوم في الحصين للفئران التي تتنقل في عمود الرائحة

Mice navigate an odor plume with a complex spatiotemporal structure in the dark to find the source of odorants. This article describes a protocol to ...

تسجيل مكانياً مقيد التذبذبات في قرن آمون التصرف الفئران

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

ضبط في الحصين ثيتا الفرقة

أوبتوجينيتيك الرائعة للذبذبات ثيتا هيبوكامبال في التصرف الفئران

حاد الدماغ الماوس تشريح للتحقيق عفوية نشاط شبكة فرس النهر

إجراء استئصال القحف لتصور الأنشطة العصبية في قرن آمون من الفئران Behaving

تسجيلات مزدوجة خارج الخلية في الحصين الفأر وقشرة الفص الجبهي

تسجيلات مزدوجة خارج الخلية في الحصين الفأر وقشرة الفص الجبهي

تسجيلات مزدوجة خارج الخلية في الحصين الفأر وقشرة الفص الجبهي

منظار صغير يسجل إشارات الكالسيوم في الحصين للفئران التي تتنقل في عمود الرائحة

منظار صغير يسجل إشارات الكالسيوم في الحصين للفئران التي تتنقل في عمود الرائحة

منظار صغير يسجل إشارات الكالسيوم في الحصين للفئران التي تتنقل في عمود الرائحة