الهدف العام من هذا الإجراء هو التعرف على تقنية فريدة من نوعها المطلوبة في عزل العقدة الليمفاوية mediastinal من الفئران. وقد أجريت العملية بعد حقن المواد المناعية المثبطة على ستة مسارات مختلفة في الفئران. في هذه الدراسة، استخدمنا فئة جديدة من المواد التي تشكل هياكل نانو الحجم.
تتكون المواد الراكعة السطحي من مجموعة الرأس المائية والذيل الماعور. تلك النموذج micelle كروية أو هيكل ثانوي آخر بسبب انفصال microphage. لقد استخدمنا هذه الخاصية إلى جزيء حيوي هو الحمض النووي.
أمفيفيلي الحمض النووي، كما هو موضح هنا، والنيوكليوتيدات العادية مثل A، C، G، T، وكتل هيدروفيلي في حين أن الخلايا العصبية المعدلة الدهون تعمل كوحدات مبيدة للماء. تم تصنيع القلة المعدلة بواسطة توليف الحمض النووي في octograms نطاق واسع. في وسائل الإعلام equi-dnas الدهنية amphiphilic تلقائيا تشكيل ميكروفونات كروية نانو الحجم.
عندما يتم تشكيل micelle ، يبقى الحمض النووي واحد تقطعت بهم السبل كناقل فارغ مع حوالي 10 نانومتر في القطر. لتزويد الناقل مع منبه المناعة، فمن مسألة بسيطة من تمديد تسلسل الحمض النووي مع حصيلة مثل مستقبلات تسعة adjuvant وهي eCpG. الحمض النووي الدهني وقاعدة eCpG هنا وبالتالي فإن السطح الخارجي من micelle متحللة مع تسلسل Cpg.
ثم نقوم بتسمية هذا الجسيمات نانو المحفّزة بالمناعة مثل INP. لتحديد الطريقة الصحيحة لل INPs للاستجابة المناعية قمنا بحقن INPs للفئران في 64 طرق الحقن وبالتالي تم تحليل الأنسجة الليمفاوية المناسبة. لمزيد من التعليمات حقن مفصلة يرجى العثور على مقال JOB التي نشرتها تشارلز ريفر في 2012.
الميزة الرئيسية لهذا الفيديو هو بصريا تبين كيفية الحصول على العقدة الليمفاوية mediastinal. الفيديو يظهر صراحة موقع العقدة الليمفاوية mediastinal التي يجد الكثير من الناس صعوبة في عزل الأعضاء. وقد أجريت جميع التجارب بموجب المبادئ التوجيهية للجنة الرعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية في مركز شنغهاي السريري للصحة العامة، أو جامعة أولسان كلية الطب.
هذا الجزء سوف تظهر الموقع المحدد للأعضاء أو الأنسجة، والتي هي حاسمة للتحليل المناعي. سيتم عزل الطحال والعقد اللمفاوية اثنين. بادئ ذي بدء ، تم التضحية بالفئران من قبل القتل الرحيم باستنشاق ثاني أكسيد الكربون ، وبذلت كل الجهود لتقليل المعاناة باتباع توجيهات اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوان واستخدامه.
من الآن فصاعداً لنجد الأعضاء ونعزلها أولاً، إصلاح الماوس بشكل صحيح على مكتب التشغيل مع أربعة دبابيس على راحة الماوس. تعقيم منطقة التشريح بالكحول.
تشريح الغطاء الخارجي الجزء السفلي من البطن الماوس مع مقص كبير الحجم. استخدم ملقط لفتح جانبي المرفق وإصلاحه بدبابيس على جدول التشغيل. يتم الكشف عن موقع العقدة الليمفاوية الإربية عن طريق العثور على الاقتران من السفينة نزولا نحو الساق اليسرى.
شكل السفينة يشبه حرف الأبجدية Y.Uncover إمالة الطبقة مع ملقط وسحبه من الجلد. قطع الصفاق مع مقص أصغر لفضح الأجهزة الداخلية. نقل الأمعاء إلى اليمين باستخدام ملقط ثم التفاف في الطحال على شكل، والتي تظهر على الجانب الأيسر الأيسر، العلوي من البطن.
مطلوب اهتمام إضافي أثناء الإجراء منذ الطحال من السهل تعطيل. وأخيرا النقطة الرئيسية لهذا الفيديو: حصاد العقدة الليمفاوية mediastinal. وهي تقع تحت الجانب العلوي من الرئة، والتي يصعب رؤيتها بسبب صغر حجمها وموقعها الخفي إلى حد ما.
كشف بعناية المنطقة باستخدام مقص صغير والملقط. قطع كلا الجانبين من الأضلاع والحجاب الحاجز كذلك. مقطع قطع الأضلاع فوق الصدر.
أثناء الإجراء تجنب تلف القلب والأوعية الدموية لأنه قد أعمى الموقع, العثور على العقدة الليمفاوية الوسيطة شفافة. إذا انفجر الوعاء الدموي عن طريق الصدفة، يمحو الدم بالشاش بلطف. الاستيلاء على الجانب الأيسر من الرئة وبنعة تحويلها إلى الجانب الآخر لرؤية تحت الرئة.
سحب ما يصل العقدة الليمفاوية mediastinal باستخدام ملقط. بعد حصاد العقدة الليمفاوية الوسيطة، تأكد من إزالة الدهون والدم المحيطة بالعقدة الليمفاوية تماماً، حيث أن الأنسجة غير المرغوب فيها قد تؤثر على التحليل. وأخيرا ، وجميع الأجهزة المعزولة على طبق بتري مليئة وسائل الإعلام.
تم تحليل إجمالي 0.1 مرة 10 إلى الخلايا السادسة على هذا التدفق للخلايا. على أساس القوة getter وحجم getter الكريات البيض السكان كان مسور وأن الخلايا كانت مستبعدة من البقع الداكنة. بعد 24 ساعة من حقن INP من قبل 64 طرق الحقن، والطحال، والعقدة الليمفاوية الإربية، والعقدة الليمفاوية mediastinal تم حصادها وتحليلها تفعيل العاصمة عن طريق تدفق الخلايا.
استنادا إلى استراتيجية تدفق الخلايا الجُلوية DC تم تعريف السكان بأنها الخلايا السلبية CD11C إيجابية ونسب في الكريات البيض الحية. وتجدر الإشارة إلى أن الحقن داخل الأنف من INP عزز زيادات كبيرة في التعبير CD40، 80، 86 في العقدة الليمفاوية الوسيطة مقارنة مع برنامج تلفزيوني للتحكم. ولذلك، تشير هذه البيانات إلى أن الحقن داخل الأنف من INP يمكن استخدامها كمناف مخاطي لتعزيز المناعة في الرئة.
